水与废水的 生物监测.ppt

二、水与废水的生物监测 张敏 学号：040506025 分子生物监测 PCR技术 生物标记物biomarker分析 什么是PCR? 聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术. 它具有特异,敏感,产率高, 快速, 简便,重复性好,易自动化等突出优点;能在一个试管内将所要研究的目的基因或某一DNA片段于数小时内扩增至十万乃至百万倍,使肉眼能直接观察和判断;可从一根毛发,一滴血,甚至一个细胞中扩增出足量的DNA供分析研究和检测鉴定.过去几天几星期才能做到的事情,用PCR几小时便可完成.PCR技术是生物医学领域中的一项革命性创举和里程碑. 基于PCR技术的生物监测 全世界每年有2亿5千万人感染水源性疾病，而不同的的微生物病原体具有不同的致病剂量，因此确定水样中病原体的数量，提高检测的准确度显得十分重要。 已经发现PCR对星状病毒的检测灵敏度比电镜更高，并可鉴定这一病毒的不同血清型。 利用多链PCR技术可检测非人源性E. coli的甘氨酸羧酶基因，从而可快速鉴定河流是否受到人粪便的污染。 英国人开发了一种基于PCR的E. coli检测方法可以在24小时完成对99种不同的环境水样的检测，与标准方法100%相吻合，现已列为泰晤士河的例行项目。 生物标记分析 是在生物化学和分子生物学技术基础上发展起来的,研究毒性物质对生物体产生毒性效应的方法,正成为生态毒理学和环境风险评价研究中的一项重要技术手段. 该方法对检测并定量分析各类混合毒性物质所引发的遗传毒性,具有积极的意义,包括以蛋白质特性为基础的蛋白质标记,检测亚细胞毒性水平遗传毒性的生理性标记,及以遗传物质DNA的结构和多态性为特征的分子标记等.该方法具有测定灵敏、快速的特性,在遗传毒性的研究中将发挥出越来越大的作用. 水污染的细菌学监测 细菌总数的测定——平皿法 总大肠菌群的测定——五日发酵法 粪大肠菌群的测定——多管发酵法 水中沙门氏菌属的测定 水中粪链球菌属的测定 总大肠菌群 当饮用水受到粪便等污染，就有可能带有沙门氏菌、志贺氏菌、弧菌、肠道病毒等，且它们均可以水为媒介引起肠道传染病。总大肠菌群含量可表明水体被污染的程度，并且间接地表明肠道病菌存在的可能，以及对人体健康具有潜在危险性。 粪大肠菌群 粪大肠菌为总大肠菌群的一个亚种；直接来自粪便，除了它耐热，在44-44.5℃的高温条件下仍可生长繁殖并将色氨酸代谢成吲哚，其他特性均与总大肠菌群相同。 由于总大肠菌群既包括粪便污染，同时也包括非粪便污染的大肠菌总数，因此，有必要在饮用水标准中增加粪大肠菌群这个指标，以便直接反映出水体是否受到粪便污染的信息，进一步确保流行病学的安全。 粪大肠菌群检测方法注解 ??? 总大肠菌群中的细菌除生活在肠道中外，在自然环境中的水与土壤中也经常存在，但此等在自然环境中生活的大肠菌群培养的最合适温度为25℃左右，如在37℃培养则仍可生长，但如将培养温度再升高至44.5℃，则不再生长，而直接来自粪便的大肠菌群细菌，习惯于37℃左右生长，如将培养温度升高至44.5℃仍可继续生长。因此，可用提高培养温度方法将自然环境中的大肠菌群与粪便中的大肠菌群区分。在37℃培养生长的大肠菌群，包括在粪便内生长的大肠菌群称为“总大肠菌群”(Total coliform)；在44.5℃仍能生长的大肠菌群，称为“粪大肠菌群”(Fecal coliform)，粪大肠菌群细菌在卫生学上具有重要的意义。 水环境的生态监测方法 水生态系统初级生产力的测定 叶绿素a的测定：叶绿素A是植物光合作中的重要光合色素。通过测定小体中浮游植物叶绿素a，可掌握水体的初级生产力的情况。在环境监测中，可将叶绿素a含量作为湖泊富营养化的指标之一。 黑白瓶测氧法：比较在有光照和无光照情况下，水中氧气含量的变化来决定光合作用与呼吸作用的强度。 指示生物 Indicator Organism法 被用来监测评价环境质量及其变化、污染程度的生物称作指示生物。 已用指示生物作为监测气象、水土、周围环境污染程度。 现在所指的指示生物包括自然指示生物、活性污泥指示生物和有毒物质指示生物等。 指示生物法 原理：水体受到污染后，水生生物的群落结构和个体数量就会发生变化，最终结果是敏感生物消亡，抗性生物旺盛生长，群落结构单一，这是生物群落监测法的理论依据。 水污染指示生物： 水污染指示生物是指能对水体中污染物产生各种定性、定量反应的生物。 浮游生物 浮游生物：悬浮在水体中的生物，可分为浮游动物（原生动物），浮游植物（藻类）两大类。多数个体小，游泳能力弱或完全没有游泳能力，过着随波逐流的生活。是水生食物链的基础，它们对环境变化反应很敏感。 浮