1常用试剂、溶液及缓冲液的配制1.基本要求.PDF

1 常用试剂、溶液及缓冲液的配制 1. 基本要求 分子生物学所用试剂必须是分析纯或分子生物学试剂级。溶液配制水尽可 能使用灭菌、蒸馏、去离子水（建议用 Milli-Q 过滤系统或类似系统进行过 滤）。除非有特殊的说明，大部分配制的溶液需用 0.22um 孔径滤膜过滤除菌 或者高压灭菌（15psi，121℃,20～30min）。使用高压灭菌的水、灭过菌的容 器以及灭过菌的贮液来配制溶液，会延长所配制溶液的使用时间。用干燥的 化学试剂和无菌水配置的溶液一般都不需要在灭菌；有些酸、碱和一些有机 化合物溶液也不需要灭菌，因为微生物不能在这些溶液中生长。制备的溶液 应该分成小分保存。如果没有特别说明，则所有贮液和缓冲液至少能在室温 下贮存六个月。作为贮液应贮存在4℃或-20℃，使用时取出到达到室温后再 开启，以防止试剂内的缩合作用，以确保度数精确。 以质量浓度表示的溶液浓度是指在 100ml 溶液中溶质的质量，质量单位为 g；以体积分数表示的溶液浓度是指总体积为 100ml 溶液中各组分成分的体 积，体积单位为ml。缓冲液的ph为25℃是溶液的ph。 2. 浓酸及碱的摩尔浓度 溶液质量分数/% 浓度 /mol/L 冰乙酸 90～100 17.4 甲酸 90 23.4 盐酸 36 11.6 硝酸 70 15.7 磷酸 85 14.6 硫酸 95 18 28（NH3 ） 氢氧化铵 14.8 氢氧化钾 50 13.5 氢氧化钠 50 19.1 3. 常用贮液与溶液 1mol/L亚精胺（spermidine） 溶解2.55g亚精胺（相对分子质量为254.6）于足量的水中，使终体积为10ml。 分装成小份。贮存于-20℃.不须将溶液灭菌 1mol/L精胺（spermine） 溶解 3.48g 精胺（相对分子质量为 348.2）于足量水中，使终体积为 10ml，分装 为小份贮存于-20℃.不须将溶液灭菌。 10mol/L乙酸铵（ammonium acetate） 将77.1g乙酸铵（相对分子质量为77.1）溶解于水中，加水定容至1L后，用0.22um 孔径的滤膜过滤除菌。 10mg/ml牛血清蛋白（BSA） 加100mg的牛血清蛋白（组分V或分子生物学试剂级，无DNA酶）与9.5ml水中 （为了减少变性，需将蛋白加入水中，而不是将水加入蛋白），盖好盖后，轻轻 摇动，直到牛血清蛋白完全溶解为止。不要漩涡混合（漩涡将产生泡沫，泡沫是 蛋白变性的结果）。加水定容到10ml，贮存于-20℃.该溶液一般不需将溶液灭菌。 1mol/L二硫苏糖醇（DTT） 最简单配制1mol/L二硫苏糖醇溶液的方法是在二硫苏糖醇5g的