氨氯吡咪对重组人蛋白激酶.pdf

( ) 4·34 · 中国药理学通报 　Chinese Pharmacological Bulletin 　2004 Apr ;20 4 :434～7 氨氯吡咪对重组人蛋白激酶 CK2 全酶的抑制动力学 1 郑克勤 　刘新光 　梁念慈 ( 1 医学遗传研究室 ,湛江 　524023) 广东医学院生物化学与分子生物学研究所、 中国图书分类号 　R 341 ;R 34557 ;R 9144 ;R 9773 ;R 9776 反义核酸、抗 CK2 的单克隆抗体等。各种实验表 ( ) 文献标识码 　A 　文章编号 2004 明 ,这些 CK2 的抑制剂均有不同程度的抗肿瘤及促 摘要 　目的 　了解氨氯吡咪对重组人蛋白激酶 CK2 全酶的 进细胞凋亡的作用[1 ,2 ] 。在第三届 CK2 国际会议 直接作用及其酶动力学机制。方法 　利用基因工程克隆、表 上 ,CK2 被认为是细胞凋亡的抑制剂 ,抑制 CK2 活 达和纯化获得重组人蛋白激酶 CK2α和 β亚基 ,在体外等摩 性即可抗肿瘤及诱导细胞凋亡 ,这一研究结果据称 尔数混合构成有最大生物活性的重组 CK2 全酶 ,在不同条 32 32 是近年来 CK2 研究领域上的新发现[5 ] 。 γ 件下通过测定转移到 CK2 底物上的[ P] GTP 的[ P] 放射 ( ) 活度来测定 CK2 的活性。结果 　氨氯吡咪对重组人 CK2 全 氨氯吡咪 amiloride 是上皮细胞钠离子通道抑 μ - 1 制剂和钙离子通道阻断剂[6 ,7 ] , 它能抑制 cAMP 和 酶具有抑制作用 ,IC 为 25757 mol ·L 。氨氯吡咪对重组 50 人 CK2 全酶的动力学研究表明 :它与 GTP 呈竞争性抑制作 ATP 依赖的蛋白激酶活性 ,但对 GTP 依赖的蛋白激 - 1 μ 用 ,抑制常数 K 值为 23630 mol ·L ;与酪蛋白呈非竞争性 i 酶是否有抑制作用尚未见报道。为了解氨氯吡咪对 - 1 抑制作用 ,抑制常数 K 值为 16363 μ 。结论 　氨氯 i mol ·L 重组人蛋白激酶 CK2 的作用及其机制 ,本文在已克 吡咪除了能抑制 cAMP 或 ATP 依赖的酶以外 ,还可以抑制以 隆表达人 CK2α和 β亚基的基础上[8～11 ] ,研究了氨 GTP 为磷酸供体的蛋白激酶。重组人蛋白激酶 CK2 可作为