乙型肝炎实验室检测技术20141014.pptVIP

乙型肝炎实验室检测技术 临床ELISA检验影响因素 临床ELISA测定现通常为采用手工操作的以微孔板条为固相的测定模式，测定操作非常简单，一般涉及到标本的收集保存、试剂准备、加样、温育、洗板、显色、比色、结果判断和结果报告及解释等方面，其中任一步骤的不当都会影响测定结果，且尤以加样、温育和洗板等步骤为甚 一、临床标本的收集和保存 要注意避免出现严重溶血 样本的采集及血清分离中要注意尽量避免细菌污染 血清标本如是以无菌操作分离，则可以在2～8℃下保存一周，如为有菌操作，则建议冰冻保存 冰冻保存的血清标本须注意避免因停电等造成的反复冻融 标本在保存中如出现细菌污染所致的混浊或絮状物时，应离心沉淀后取上清检测 二、试剂准备 实验开始前，将试剂盒先从冰箱中拿出来，在室温下放置20分钟以上后，再进行测定 蒸馏水或去离子水应保证质量 三、加血清样本及反应试剂 加样不可太快，要避免加在孔壁上部，不可溅出和产生气泡 四、温育 要保证在设定的温度下有足够的反应时间 温育温度的选择 “边缘效应”的排除 五、洗板 固相免疫测定技术是一种非均相免疫测定技术，需以洗涤操作将特异结合于固相的抗原或抗体与反应温育过程中吸附的非特异成份分离开来，以保证ELISA测定的特异性 六、显色 在加入底物开始显色反应前，最好是先检查一下底物溶液的有效性 临用前配制 七、比色