制备色谱离子色谱和超临界流体色谱.ppt

第八章 Chapter 8 目 录 1. 高效制备液相色谱HPPC 2. 离子色谱IC 3. 超临界流体色谱SFC 一、高效制备液相色谱HPPC high performance preparative liquid chromatography HPPC发展 20世纪50-60年代第一个制备柱色谱仪； 70年代第一套制备液相系统，小粒径、高压泵 2. 液相制备色谱的方法 3. 制备型液相色谱仪 二、离子色谱 Ion Chromatography, IC 1. 离子色谱法原理  principle of IC 离子色谱法原理 2. 离子色谱的优点 3. 离子色谱装置类型 suppressed apparatus of IC 离子色谱连续抑制装置图 离子色谱连续抑制原理图 4. 离子色谱的应用 application of IC 5. 离子色谱法展望 固定相：合成新的低交换容量离子交换树脂 流动相：新的洗脱液 检测器：高灵敏度 三、超临界流体色谱 SFC  supercritical fluid chromatography 超临界流体性质 2. 原理 压力效应： 程序升压 3. 超临界流体色谱的结构与流程 Instrument structure and the general process of SFC (2) 主要部件 主要部件 4. 超临界流体色谱的应用 Application of SFC 4. 超临界流体色谱的应用 Application of SFC (2) 甘油三酸酯的分析 思 考 题 查阅相关资料，描述制备型液相色谱、离子色谱和超临界流体色谱的方法原理和应用特点。 (1) 聚苯醚低聚物的分析 色谱柱：10 m×63μm毛细管柱 固定相：键合二甲基聚硅氧烷 流动相：CO2；120?C；程序升压 四种组分仅双键数目和位置不同，难分离。 色谱柱：DB-225 SFC毛 细管柱 流动相：CO2，15MPa程序升到27MPa；2.5 h完全分离。 * * 现代色谱分析 Modern chromatography 制备型液相色谱：获得高纯（色谱纯）物质的有效方法。 基本原理： 利用各组分物理化学性质差异，使其不同程度分布在不相溶的两相中，且各组分在两相多次分布，从而达到分离的目的。 HPPC特点: （1）多为细颗粒多孔填料，分离效率高； （2）应用广泛，如极性和非极性、离子型和非离子型、小分子和大分子、热稳定性和热不稳定性化合物； （3）据化合物理化性质配检测器, 如 UV、DAD、FD、ELSD; （4）可连续自动化操作。 分析柱：内径1～6 mm，柱长5 ～30 cm 半制备柱：内径8 mm，长15～30 cm，一次制备0.1～1 mg 制备柱：内径20～50 mm，柱长50 cm，粒径25 ～100 μm， 流速可达数十mL/min 比较： 高效液相色谱法：分离分析，追求高准确度、分析精度。 液相制备色谱法：分离纯化，追求低成本。 比较： 化合物分离或/和纯化 化合物定性或/和定量 样品从检测器进入收集器 样品从检测器进入废液瓶 制备液相 分析液相 HPPC应用 化工、制药、天然产物、生物技术和生化中珍贵产品的分离和纯化。 工业规模、活性化合物、药物 kg 标准品 毒理试验化合物 g 生物、生化试验 结构鉴定：合成副产物、生物基质中代谢物、天然产物 mg 酶的分离 pg 应用范围 量 按固定相分类： 半制备型（小规模制备型）：≤100 mg 制备型：0.1～100 g 大规模制备型：≥100 g HPPC分类 按进样量分类： 正相、反相、凝胶、离子交换、亲和色谱等 1. 色谱柱的柱容量（柱负荷） 超载：进样量超过柱容量。柱效迅速下降，峰变宽。 对分析柱：不影响柱效时的最大进样量 对制备柱：不影响收集物纯度时的最大进样量 超载可提高制备效率，以柱效下降一半或容量因子k降低10%为宜 收集组分的几种情况： （a）可获得良好分离，主峰 （b）用制备柱，超载提高效率； （c）两主成分之间的小组分； 超载，分离切分使待分离组分成为主成分（富集）后，再次分离制备。 制备型液相色谱：结构与分析型一样，但泵流量大、进样量大、采用制备柱；柱后馏分收集器。 制