重金属抗性细菌Y3的筛选鉴定及其-自然科学版-中南民族大学.doc

铜胁迫下菌株CL01促进紫云英生长的研究 程国军曾小波周艳琳田梦洋 （中南民族大学生命科学学院武汉 430074） 摘要本研究从湖北某矿区植物根际土壤中筛选到一株多种重金属抗性菌株CL01.根据形态学特征和16S rDNA序列比较结果，鉴定其为Achromobacterxylosoxidans.当土壤所含铜浓度为75 mg?kg时，接种菌株CL01可以促进紫云英根延长，增加植株高度，提高紫云英的生物量.菌株CL01通过减少根际土壤可吸收的铜含量，减少了铜在紫云英根部的聚集，说明该细菌提高了植物的抗铜能力. 关键词植物生长促进菌种；重金属抗性；鉴定；生物量；铜胁迫. 中图分类号S154.3文献标识码 A 文章编号1672-4321(2014)03- Growth-Promoting Effect of Strain CL01 on Astragalus sinicus Under copper Stress Condition Cheng Guojun, Zeng Xiaobo, Zhou Yanlin, Tian Mengyang (College of Life Science, South-Central University for Nationalities, Wuhan 430074, China) AbstractA heavy metal resistant strain CL01 was isolated from the rhizosphere soil of a heavy metal mine area in Hubei Province. The strain was identified as Achromobacter xylosoxidans based on the morphological characteristics and analysis of 16S rDNAsequence.With75 mg?kg-1 Cu2+in the soil, inoculation with the CL01enhanced roots, improved Astragalus sinicus growth height, promoted the fresh weights of the plants grown.Strain CL01significantly decreased Cu accumulation in the roots of Astragalus sinicus by reducing the amount of absorbable Cu of rhizosphere soils, revealing the strain CL01 could improve the ability of plants to resist copper. Keywords plant-growth-promoting strain; resistant to heavy metals; identification; biomass; copper stress 收稿日期 2013-11-11 作者简介 程国军(-),男,副教授,研究方向:,Email: chengguojun@mail.scuec.edu.cn 基金项目 近年来，由于人口的快速增长和工业化进程的加速，环境污染加剧，土壤遭到破坏，尤其是土壤重金属污染.土壤重金属污染的污染物在土壤中很难移动滞留时间较长难以被其他微生物降解，并可通过水、植物媒介的传递而影响人类生命健康[1]. 为缓解土壤重金属污染问题，国内外专家曾采用非毒性改良剂法、深耕法、排土法和客土法以及化学冲洗等方法，但方法的局限性，未能得到理想的治理效果.近年来，生物学方法因成本低、能耗小、无二次污染、处理效果好具有广泛的应用前景[2]. 本湖北大冶市某矿区某植物根际土样中筛选到1株重金属抗性菌CL01，并根据其形态和16S rRNA基因序列，对其进行了鉴定.在模拟铜污染土壤中种植紫云英，发现其具有较好的促进紫云英抵抗铜胁迫的作用，通过测定紫云英的生物量、植株不同部位的含铜量土壤中不同状态铜含量，进一步揭示了该细菌促进植物抵抗铜胁迫的机理，为重金属污染土壤的微生物修复提供重要理论基础. 1 材料与方法 752型紫外可见光光度计（上海光谱仪器有限公司），AA1700原子吸收分光光度计（浙江福立分析仪器有限公司），DNA凝胶回收试剂盒（博大泰克），2×Power Taq PCR MasterMix(北京百泰科生物技术有限公司)，pMD18-T Vector (宝生物工程大连有限公司)，测定分析所用试剂均为分析纯，由国药集团化学试剂有限公司生产。 氯化铜（C