对几种百合科植物基因组大小评价.pdfVIP

维普资讯 ≥47}(2} 7一哆 ， ．劫级、 武汉植物学研究 1996，14(3)：199～203 Journalo1WuhanBotanicalResearch 对几种百合科植物基因组大小的评价 砌I武 大学生命科学学学院 武搜 4300721 r武 大学分析涮试中心 ．iI=槛 430072】，×y毕7 ， ．7 经典细胞学对某种生物的细胞核DNA含量和基因组大小研究只停留在定性说明 上一为了清楚地认识细胞核DNA，对其定量分析是很必要的。随着对生物细胞核型研究的 深入和细胞学染色技术的发展，不仅细胞，甚至单个染色体已能清晰地显现 越来越多的 物种染色体核型图见诸于报道，染色体组或基因组的研究也更引人瞩 目“ 。这些均为核 DNA定量分析提供了必要基础。近年来，显微分光光度术和计算机在生物科学领域的应 用．为细胞核DNA从定性转到定量研究提供了可能 现在，部分物种的细胞校DNA含量 已被精确地测量．而且单个染色体上DNA含量的测定已进行过尝试，从而为基因组大小 的评价提供了更直接的数据和更新的途 … ”。同一物种的基困组大小是相当稳定的， 是各个物种固有的特征参数。因此对基因组大小(即染色体组大小)的评价就可以为物种 的系统进他、分类和遗传等研究提供客观的证据 、-” 在本实驻中，利用孚尔根显微分光光度法测定了百合科4种植物的细胞棱DNA含 量，并对它们的基因组大小作出了评价。 用显微分光光度术测定Feulgen染色的细胞核DNA含量时，为了避免误差，国际上 采用鸡红血细胞核DNA含量作为一种内部标准 。。，从而使求得的绝对值更为直观，由于 洋葱根尖细胞制片技术的成熟．它已作为另一种参考标准。本实验同时采用这两种标准使 测量数值更具说服力。 收靖}j：119504川l．偿阿J【；199510l7 第 一怍肯 ．26岁 域 I 孙 坦，赶宁编 显微镜光 i州帕舒斩 武汉人学分析测试科学系 艾 1988 维普资讯 武 汉植 物学 研 宄 第 14卷 1 材料与方法 1．1材料 (1)洋葱(AltiumcepaI．)，市售。 (2)藻头(AltiumchineseG．Don．)、分葱(AltiumascaloniumL．)均取自武汉大学生 命科学学院植物细胞实验室。 (3)黄花(HemerocaltiscitrinaBaroni)取自武汉大学生命科学学院植物生理实验室。 (4)鸡红血细胞，取自武汉大学生命科学学院鸡场成年公鸡静脉血。 1．2 方法 1．2．1 植物制片方法 将上述4种材料洗净，剪去原来生长的根，在室温(20C)下重新发根。待根尖长1cro 左右时，取根尖 用卡诺固定液(无水乙醇 ：冰醋酸一3：1v／v)室温下固定3h．再用双 蒸水洗 3次(3×10min)。然后按1：1(V／V)加入2 果胶酶和1 纤维素酶，于30C温 箱中酶解1h后用双蒸水洗 3次(3×10min)。酶解后的根尖放在60C水浴中用 1mol／L HCI酸懈 10min，取出．水洗 3次(3×10rain)。洗净的根尖用Schiffs试剂染色 1h。染色 后再用SO 水和蒸馏水各洗 3次。每次10m[n。将已染色的根尖加 1滴45 醋酸压片， 然后放入冰箱冷藏室冰冻 待结冰后揭片，室温下晾干，用中性树胶封片，待测。 1．2．2 鸡红血细胞制片方法 取公鸡静脉血，用肝素抗凝剂稀释．涂片于1／2载玻片处，用卡诺固定液(无水乙醇 ： 冰醋酸=3：1v／v)固定1h，再用95 乙醇洗2次，每次 10min，晾干后，保存于4C冰 箱中备用。鸡红血细胞染色与封片方法与根尖相同。 ’ 1．2．3 细胞核DNA测量与计算 测量所用仪器为扫描显微镜光度计(Scanningmicroscopephotometer，UNIVAR． Reiehert