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年41412008级临床第三章出血、血栓与止血的
实验三 实验三血栓与止血、骨髓细胞形态学检查 实验目的: 1.掌握PT、APTT、TT、原理、参考值及临床意义。 2.掌握增生性贫血骨髓像特点。 3.了解正常骨髓像特点。 4.了解急性白血病分型及骨髓像特点。 实验原理:PT、APTT、TT。 问题:缺铁性贫血或巨幼红细胞性贫血血象、骨 髓象特点? 内容 一、止血、凝血和纤溶的机制二、血小板检测的临床意义三、凝血系统检查四、纤维蛋白溶解系统的作用五、血凝仪的简况介绍 六、正常M、B象。 七、白血病M、B象。 八、贫血M、B象。 一、止血、凝血和纤溶的机制 正常人具有复杂而完整止血机制,主要依赖: 1)血管壁的结构和功能; 2)血小板的质量和数量; 3)血浆凝血因子活性; 4)健全神经体液调节。 血管、血小板、凝血因子、纤溶素、血浆抑制物等正常情况处于静息状态,一旦有出血发生,几秒内就可激活,并通过血管收缩,血小板血栓和纤维蛋白的形成来完成止血过程。 二、血小板的作用 当血管受损时,血小板迅速黏附于暴露的胶原组织,发生粘附、变形、释放等反应。 激活的血小板可释放5-羟色胺和ADP等物质,进一步加速血小板的变性,聚集,成为不可逆的第二相聚集,形成白色血栓,构成初期止血屏障。 如血小板数量少、质量差会造成出血、止血功能障碍。 血小板计数原理 将一定量血液放入血小板稀释液中,使红细胞破坏,冲入计数池中,高倍镜下计数一定体积内血小板数,最后换算成每升血液中血小板数。 操作 在清洁试管中加入稀释液0.99ml。 耳垂、指端血10ul,擦去管外血液,置于血小板稀释液内,立即混匀,室温下3--5分钟。 取血小板悬液一滴,加至计数池内静止10--15分钟,使血小板下沉。 用40x计数中央大方:四角+中间=5个中方格的血小板数,将数得的总数(T)乘以5000即为每ul血的血小板数,再乘以106得每升血中血小板数。 (即T×5×109/L)。 报告: PLT:???×109/L 计数板 计数板 意义:参考值(100~300)×109/L 生理性:正常人晨低,午后高,春高冬低,静脉毛细血管,月经早期低,妊娠中晚期高,娩后低。 病理性:血小板 400×109/L称增多。 1.反应性增多:急性出血、急性溶血、急性化脓感染; 2.原发血小板增多: 骨髓增生性疾病、慢粒白血病;真性红细胞增多症;脾切除。 血小板100×109/L称减少,50×109有出血现象。 1.血小板生成障碍:再生障碍性贫血,急性白血病; 2.血小板破坏过多,如ITP,SLE,脾亢。 3.血小板消耗过多:如DIC,血栓性血小板减少性紫癜。 二、凝血系统检查 正常机体无出血及血栓出现 ↓ 抗凝血 凝血 纤溶 纤容抑制 亢进 减弱 减弱 亢进 血栓形成 出血不止 内源 外源 三、凝血系统检查 Ⅻ Ⅲ Ⅹ Ⅹa Ⅴ Ⅱ Ⅱa ↓ Ⅰ Ⅰa 1.内源性凝血途径: 内源性凝血指因子Ⅻ激活,到激活因子X的过程。 当血管壁发生损伤,因子Ⅻ被内皮下胶原激活为Ⅻa,Ⅻa 则激活Ⅺa因子。 继之Ⅺa激活Ⅸa, Ⅸa→Ca2+→Ⅷa→PF3共同形成复合物,从而激活因子↓ Ⅹ---→Ⅹa 。 因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ 缺乏时可见于各种血友病,并有凝血时间延长。 活化部分凝血活酶时间测定(APTT) [原理] 在受检血浆中加入部分凝血活酶磷脂悬液,在Ca2+的作用下观察血浆凝固所需的时间,是内源性凝血系统的筛选试验。 血浆0.1+试剂0.1 0.1 Ca2 立即计时 观查凝固现象 出现纤维蛋白 停止计时。 [参考值]32-43s 比正常对照值延长 10s 以上为异常 [临床意义]1.延长:见于Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ减少如血友病。严重凝血酶原、因子Ⅴ、因子Ⅹ、纤维蛋白原缺乏症,口服抗凝剂,应用肝素。2.缩短:血液高凝状态,血栓性疾病,抽血不顺利混有大量组织液。 是目前推荐应用的内源凝血系统的筛选试验,又是监测肝素治疗的首选指标。 2.外源性凝血途径: 从因
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