小鼠IL-4 ELISA kit说明书.pdfVIP

Mouse IL-4 ELISA KIT 目录号 规格 CMK0012 96 Tests CMK0012 48 Tests _________________________________________________________________ (本试剂盒用于体外定量检测小鼠血清、血浆或细胞培养上清液中天然和重组IL-4 浓度，供科研 使用。使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分, 若有任何疑问请与嘉美生物技术有限公司 联系，您将得到我们的技术支持。 $ 简介： IL-4是一种由活化的T细胞产生的细胞因子，以往称为B细胞生长因子1。在B细胞生长的早期 活化B细胞，并使被抗原、抗IgM或脂多糖活化的B细胞进入细胞 期G1期。IL-4增强MHCII类抗原 的表达和CD23 （Fc RII ）在B细胞上的表达，诱导同种型（isotype ）转换，如促使小鼠B细胞从分 泌IgM、IgG3、 IgG2b转变成分泌IgG1、IgG2a、IgA和IgE。也增强单个核吞噬细胞表达MHCII类抗 原，但对炎症性细胞因子 （如IL-1,TNF,IL-8 ）的释放和这些细胞的杀菌活性有抑制作用。IL-4 也活化细胞毒性 T细胞，它被认为是典型的由TH2细胞产生的细胞因子，对于T,B淋巴细胞的发育 以及驱动体液免疫反应和抗体产生都是十分重要的。 检测原理: 实验采用双抗体夹心ELISA法。抗小鼠IL-4单抗包被于酶标板上，标本和标准品中的IL-4会与单 抗结合，游离的成分被洗去。加入生物素化的 抗小鼠IL-4抗体和辣根过氧化物酶标记的亲合 素。生物素与亲合素特异性结合；抗小鼠IL-4 抗体与结合在单抗上的小鼠IL-4结合而形成免 疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色剂， 若反应孔中有IL-4 ，辣根过氧化物酶会使 色 的显色剂现蓝色，加终止液变黄。在450nm处 测OD值，IL-4浓度与OD450值之间呈正比，可 通过绘制标准曲线求出标本中IL-4浓度。 标本收集: 1. 收集血液的试管应为无热原和内毒素试管。 2. 血浆抗凝剂推荐EDTA。 3. 避免溶血，高血脂标本。 4. 标 应清澈透明，悬浮物应离心去除。 5. 标 收集后若不及时检测，请按一次用量分装，冻存于－20 ℃，避免反复冻融。 6. 可根据实际情况，将标 做适当倍数稀释(建议做预实验，以确定稀释倍数) 。 注：正常小鼠血清或血浆样本建议做1：2稀释。 试剂盒组成: 1a 标准品 2/1支(冻干)* 4 ℃ 1b 标准品和标 稀释液 1瓶 4 ℃ 2a 浓缩生物素化抗体 2/1支* 4 ℃ 2b 生物素化抗体稀释液 1瓶 4 ℃ 3a 浓缩酶结合物 2/1支* 4 ℃(避光) 3b 酶结合物稀释液 1瓶 4 ℃ 4 浓缩洗涤液 20 × 1瓶 4 ℃ 显色剂 1瓶 4 ℃(避光) 终止液 1瓶 4 ℃ 抗体包被板条 8 ×12 或 8 ×6* 4 ℃ 封板胶纸 3/2 张* 说明书 1份 *:[96/48 Tests] 所需物品(不提供，但可协助购买) : 1. 酶标仪(450nm) 2. 高精度加液器及吸头：0.5- 10,2-20,20-200,200- 1000ul 3. 37 ℃温箱, 双蒸水或去离子水，坐标纸。 注意事项: 1. 试剂盒保存在2-8 ℃，除复溶后的标准品，其他成分不可冻结。