基于乙酰胆碱酯酶传感器的农药药效检测新方法论文.pdfVIP

第26卷增刊 分析试验室 vo】．26．Suppl． Chinese of 200r7一10 2007年iO月 Journal AnalysisLaboratory 基于乙酰胆碱酯酶传感器的农药药效检测新方法 陈世桢，杜丹。，张爱东 (农药与化学生物学教育部重点实验室，华中师范大学，武汉430079) 摘要：本文将乙酰胆碱酯酶(ACllE)固定于金纳米，溶胶凝胶复合膜修饰的玻 碳电极表面，利用循环伏安法表征了3种不同的有机磷农药以及氨基甲酸酯类 农药西雏因对酶活性的抑制作用，并评价了这3种农药的灵敏度。 关键词：乙酰胆碱酯酶；传感器；电化学检测；金纳米；农药药效 酶抑制法测定农产品中有机磷及氨基甲酸酯 循环伏安曲线显示固定于AuNPs-SiSG复合膜 mM 类农残是根据农药的毒性对酶分解底物的抑制作 修饰电极表面的AChE在O．35ATEl的PBS缓 用进行的，主要使用的酶有动物酶源的胆碱酯酶和 冲溶液中(pH7．O)表现出一个明显的氧化峰，峰 从植物中提取的植物酯酶。本文以酶抑制法为原 电位为+O。65V。由图ld和e可知，金纳米的加 理，即有机磷或氨基甲酸酯类农药能抑制乙酰胆 入使峰电流明显增大，峰电位显著降低，因此金 碱酯酶(AChE)催化底物一氯化乙酰硫代胆碱纳米能加速酶的活性位点与电极之间的电子传导， 提高检测的灵敏度。图1的内插图显示了在相同 (ATCJ)水解产生有电化学活性的硫代胆碱，通过 检测峰电流减小的程度来定量测定农药含量，以 浓度的不同农药中分别抑制10rain后(曲线f：甲 电鳗中提取的动物酯酶为检测用酶，建立了电位 基对硫磷，曲线g：西维因，曲线h：久效磷)与未 法快速检测有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的方 被抑制的电流(曲线i)大小的比较。 法，并评价了该方法对多种农药残留检测的灵敏 度。此种方法可用来筛选高效的农药以及高效的 酶抑制剂。 1实验部分 1．1酶修饰电极的制备 将20止JIEoS，60止乙醇，150肚金纳米， 600血0．5m#mL壳聚糖溶液(最终浓度0．3％)混 合。将混和物超声O．5h直到形成澄清透明的溶 M 胶。最后加入170止0．1NaOH调节pH范围为 7—8。 图1循环伏安图 玻碳电极(GcE)进行电化学预处理得到羟基 in 7．0 a—GCE：b—A∞AuNPs-SiSG／C,CEPBS；c— pH 化表面，取3．0止制备好的溶胶凝胶滴涂于电极 表面，将其置于室温干燥2h后滴加5．O皿AChE 25℃干燥30rain备用。 in 7．0PBS 伏安图AChE-AuNP}SiSCdGEEpH c0|岫I．0 afar with 1．2抑制率I mM inhibition