猪圆环病毒2型ORF2基因在大肠杆菌中的表达.pdf

业生物技术学报 Journal of Agricultural Biotechnology 2004,12 (): ·研究论文· 猪圆环病毒2 型BF 株 基因在大肠杆菌中的表达* 忠田 郭 鑫 杨汉春** 陈艳红 查振林 （中国 业大学农业部预防兽医学重点实验室，北京 100094 ） ： （ 摘要 采用PCR 从构建的猪圆环病毒2 型（PCV2 ）ORF2 重组质粒 pGEM-T- ）中扩增出大小为593 bp 的 基 因，克隆到表达载体pET-32a ，经异丙基硫代半乳糖苷诱导，成功表达了ORF2 基因编码的结构蛋白。表达的重组蛋白为融合蛋 白，分子量40 kD ，表达量20%左右。经Western-blot 检测，重组蛋白可被PCV2 性血清所识别。 关键词：猪圆环病毒2 型； 基因；表达 Expression of gene of Porcine Circovirus Type 2 BF Strain in WANG Zhong-Tian GUO Xin YANG Han-Chun** CHEN Yan-Hong CHA Zhen-Lin （Key Laboratory of Preventive Veterinary Medicine, Ministry of Agriculture ，China Agricultural University ，Beijing 100094 ，China ） A fragment of gene with a size of 598 bp was amplified by PCR from pGEM-T- of porcine cicovirus type 2 and cloned into pET-32a vector. The recombinant plasmid was successfully expressed in BL21 （DE3 ）of by induction of IPTG. The molecular weight of fused recombinant protein was 40 kD by SDSwith a expression amount of approximately 20% of total bacterial protein, and could be recognized by antiserum against PCV2 by using Western blot. porcine circovirus type 2; gene; expression 猪圆环病毒 2 型（Porcine circovurus type 2 ， 法的建立奠定物质基础。 PCV2 ）是近年来危害养猪生产的一种重要病原，可 1 材料和方法 引起仔猪的断奶后多系统衰竭综合征（post-wean- ing multisystemic wasting syndrome ，PMWS ）、母猪 1.1 质粒和菌株 繁殖障碍、猪皮炎和肾病综合征等疾病(Quintana et pGEM-T-ORF2 质粒由本实验室构建（Lu et al., al., 2001; Meehan et al., 200 1; Allan et al., 2000)。近 2002 ）