毒作用机制课件.ppt

c 谷胱甘肽过氧化物酶GSH-Px（GPO）：在机体内广泛存在，能特异地催化谷胱苷肽对过氧化物的还原反应，使过氧化物转化为水或相应的醇类。可阻断脂质过氧化的链锁反应。 d 谷胱苷肽还原酶（GR）：其分布同GSH-Px，主要功能是产生还原型的谷胱苷肽(GSH)，以保证机体解毒功能的执行。 e 心肌黄酶(DT diaphorase):葡萄糖-6-磷酸脱氢酶。 谷胱甘肽的抗氧化作用 GSH GSSG H2O2 H2O GSH-Px 还原型谷胱甘肽 氧化型谷胱甘肽 谷胱甘肽过氧化物酶 三、自由基对生物大分子的损害作用 氧化应激（Oxidative Stress）： 氧自由基所致细胞毒性作用； 抗氧化失衡状态 (一)脂质过氧化作用及其损害 脂质过氧化(lipid peroxidation) ：指主要由自由基引起的多不饱和脂肪酸的氧化作用对生物膜具有强烈的破坏作用。 脂质过氧化的过程： ①启动阶段：脂质过氧化是由一些脂链侧链甲叉碳上除去一个氢的化合物所启动。OH·是最重要的脂质过氧化的诱导物。 ②发展阶段：已形成的自由基将作为启动子而产生新的自由基，使反应发展下去。在发展阶段中，形成的自由基总数保持不变，一种自由基团可经多种反应转变成另一种形式的自由基团。去氢后的碳原子形成中心自由基(L·)。与脂质过氧化反应关系最重要的是脂质过氧化自由基和脂质过氧化物的形成。 ③终止阶段：只有二个自由基相互作用，才能使自由基反应链终止，消除自由基。 脂质过氧化的后果： ①细胞器和细胞膜结构的改变和功能障碍。 ②脂质过氧化物的分解产物具有细胞毒性，其中特别有害的是一些不饱和醛类。 ③对DNA影响： 脂质过氧化自由基和烷基自由基可引起DNA碱基，特别是鸟嘌呤碱基的氧化； 脂质过氧化物的分解产物，丙二醛可以共价结合方式导致DNA链断裂和交联。 ④对低密度脂蛋白(LDL)的作用。 （二）蛋白质的氧化损伤 1．机制： (1)对脂肪族氨基酸氧化损伤最常见的途径为：在α-位置上将一个氢原子除去，形成C—中心自由基，再加氧其上，生成过氧基衍生物。后者分解成NH3及α-酮酸，或生成NH3、CO2与醛类或羧酸，破坏脂肪族氨基酸的结构。 (2)芳香氨基酸很少出现α-除氢，而多出现羟基衍生物。后者可将苯环打开或在酪氨酸处交联成二聚体。 (3)由过渡金属介导出现氧化损伤，主要通过Fenton反应（过氧化氢与二价铁离子混合溶液具有强氧化性），其损伤特点为部位特异性。因为，在蛋白质结构内只有某个或几个金属结合部位的氨基酸受到影响。 (4)脂质过氧化的自由基中间产物作用，如烷氧自由基(LO·)和过氧自由基(LOO·)，可与过氧化脂质紧密联系的蛋白质反应。 2．后果 氧化的后果是凝集与交联，或是蛋白质的降解与断裂，这主要取决于蛋白质成分的特征及自由基的种类。 对蛋白质影响表现在二个方面： 直接作用 间接作用 （三）核酸的氧化损伤： 1．碱基损伤 活性氧攻击DNA的靶位点是腺嘌呤与鸟嘌呤的C8，嘧啶的C5与C6双键。 其可能的机制为： ①氧自由基直接作用于双键部位，使之获得一个加合物而改变其结构。 ②·OH使脱氧核苷脱嘌呤，即自由基可使DNA链上出现无嘌呤或无嘧啶部位。 ③·OH可以自动从胸嘧啶的甲基中除去H原子。 8-OHdG是重要的毒理学生物标记物。 2．DNA链断裂 ①·OH对DNA的攻击，主要针对DNA分子中的核糖部分，可能的位置在DNA分子中核糖的3’和4’碳位上，造成DNA链的断裂。 ②自由基对胸腺嘧啶碱基作用，造成的损害经修复酶切除，可产生类似的单链断裂。 ③氧化应激可启动细胞内的一系列代谢过程，激活核酸酶，导致DNA链的断裂。 DNA链断裂在基因突变的形成过程中有重要意义。 DNA链断裂后，有下列途径产生突变： ①DNA链断裂造成部分碱基的缺失； ②DNA链断裂后，正常的细胞将启动修复过程，多种酶可以辨别DNA内异常，并通过切割、再合成、重合等途径使之修复。如酶也受自由基破坏或功能难以达到修复的要求，可能造成被修复的DNA碱基的错误掺入和错误编码； ③可能引起癌基因的活化，或抑癌基因的失活。 第五节 化学毒物与细胞大分子的共价结合 终毒物与靶分子反应的类型： 非共价结合（nonconvalent binding） 共价结合（convalent binding） 去氢反应 电子转移 非共价结合（nonconvalent binding） 通过非极性交互作用或氢键与离子键的形