细胞冷冻冰晶损伤及应激损伤机理.pdf

《生命的化学》2009年29卷3期 · 490 · ● CHEMISTRY OF LIFE 2009，29(3) 文章编号: 1000-1336(2009)04-0490-05 细胞冷冻冰晶损伤和应激损伤机理 袁晓华 (乌鲁木齐血液中心，乌鲁木齐 830000) 摘要：低温下保存生物材料可使临床研究不受限于时间空间，安全有效的细胞冻存可以为组织工程、基因治疗和 细胞移植提供丰富的细胞来源。冷冻保存已经成功应用于许多细胞株系，但不同来源的细胞系冻存效率差别很大， 仍有细胞系在提高低温冻存效率时面临瓶颈无法突破。细胞冷冻损伤机理在冰晶损伤和细胞应激损伤方面还有待 更深入的了解，本文将集中讨论近年来这方面的一些研究进展。 关键词：冷冻损伤；胞内冰晶；间隙连接；调亡；热激蛋白 中图分类号：Q65/Q813 自从1949年Polge等意外发现甘油对家禽精子 身不是绝对有害的，它取决于这些冰晶是否会在复 [1] 的冷冻保护作用以来，人们一直在探索细胞冷冻损 温过程以微小冰晶为核，发生再结晶 。近年Acker [2-5] 伤的机制，希望能够从中寻找一些复杂细胞组织未 等 对细胞冷冻过程中胞内外冰晶的形成机制做了 能实现低温冻存的原因并开发新的途径。一般认为 一系列的研究，提出了无害胞内冰 [2] 在降温和升温过程中细胞内外水分的结晶程度和温 cellular ice formation)。他们比较了单个培养和单层 度变化速率达到最佳平衡是至关重要的，通过对不 培养细胞冷冻时的胞内冰晶对细胞复苏率的影响， 同来源的细胞采取不同的冷冻保护剂配方，调节降 认为对于单个细胞，胞内冰的成核生长对细胞有害， 温升温速率，最大限度地避免冰晶的生长和细胞体 但对于以单层细胞形式冷冻来说，胞内冰沿细胞间 积过度变化，使许多株系的细胞得到成功冻存。但 隙在相邻细胞的扩散是无害的，甚至部分胞内冰的 还有许多细胞株在提高冷冻保存效率时面临瓶颈无 形成避免了细胞过度脱水和体积骤变对细胞膜、细 法突破，这体现了细胞对冷冻损伤反应的种属特异 胞器造成的损害，具有冷冻保护作用。而胞外冰晶 性，“耐冻”与“不耐冻”细胞株之间的区别在哪里？ 的形成也不是绝对无害的，如人胚胎干细胞以紧致 本文综述了近年来细胞冷冻损伤机理研究方面的一 的细胞团形式冷冻保存，胞外冰晶的形成会破坏细 [8] 些进展。 胞的间隙连接，造成细胞岛团松散，复苏率极低 。 1.细胞冻存中的冰晶损伤 总的来说，细胞以单个细胞悬液、单层细胞还是以 Mazur的“两因素假说”将细胞冷冻损伤归结于 多层细胞团形式冻存会造成冰晶的生长模式的不 [6] “溶质损伤”和 “胞内冰损伤”两大原因，人们也是 同 ；冰晶的形成不是绝对有害的，细胞冷冻降温 从尽量避免此两种伤害来设计防冻液成分及降温速