选修1-第4讲DNA和蛋白质技术和植物有效成分的提取课件.ppt

菜 单 高考总复习·生物 演实战 . 高效训练 切脉搏 . 核心突破 菜 单 高考总复习·生物 演实战 . 高效训练 切脉搏 . 核心突破 第4讲　DNA和蛋白质技术和植物有效成分的提取 [目标导航]　1.PCR技术的基本操作和应用　2.蛋白质的提取和分离　3.从生物材料中提取某些特定成分 考点一DNA的粗提取与鉴定 1.提取原理：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中不同。 ①在NaCl溶液浓度为 mol/L时，DNA的溶解度最小。 ②DNA不溶于，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。 溶解度 0.14 酒精 2．主要步骤：选取实验材料―→破碎细胞，获取含的滤液―→去除滤液中的杂质―→DNA的。 3．DNA的鉴定：DNA＋二苯胺蓝色。 DNA 析出与 鉴定 沸水浴 (1)本实验不能用哺乳动物成熟红细胞作实验材料，原因是哺乳动物成熟红细胞无细胞核。可选用鸡血细胞作材料。 (2)实验中两次使用蒸馏水，第一次的目的是使成熟的鸡血细胞涨破放出DNA，第二次的目的是稀释NaCl溶液，使DNA从溶液中析出。 考点二PCR技术 1.PCR原理： ①反应场所：在一定的中。 ②反应条件：提供模板，分别与两条模板链相结合的两种，四种脱氧核苷酸，耐热的。 ③过程的控制：控制使DNA复制在体外反复进行。 缓冲溶液 DNA 引物 DNA聚合酶 温度 2．PCR过程：PCR一般要经历多次循环，每次循环可以分为、和三步。 3．PCR结果：两引物间固定长度的DNA序列呈扩增(即2n)。 30 变性 复性 延伸 指数 归纳总结 比较细胞内DNA复制与体外DNA扩增(PCR) 项目 DNA复制 PCR扩增 不 同 点 场所 细胞内 细胞外 能量 ATP提供能量 不需ATP提供能量 酶 解旋酶、DNA聚合酶 耐高温的TaqDNA聚合酶 是否有转录 伴有转录，产生引物 无转录，需加入两种引物 不 同 点 特点 边解旋边复制，半保留复制 体外迅速扩增 循环次数 受生物体自身控制 30多次 缓冲液 不需要 需要人为控制 设备 无 严格控制温度变化的温控设备 相 同 点 原料 四种脱氧核苷酸 复制原理 严格遵循碱基互补配对原则 模板 DNA为模板 引物 都需要与模板相结合的引物 考点三血红蛋白的提取和分离 1.常用的分离方法：法、凝胶电泳法等。 2．纯度鉴定：一般用方法来测定蛋白质的相对分子质量。该方法电泳时蛋白质分子的迁移率主要取决于。 凝胶色谱 SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳 蛋白质分子的大小 归纳总结 分离DNA和蛋白质的比较： 比较项目 分离DNA 分离蛋白质 实验原理 DNA与蛋白质在不同浓度NaCl溶液中及在酒精溶液中的溶解性差异 依据相对分子质量的大小或带电性质差异分离蛋白质 实验过程 选材→破碎细胞释放DNA→除杂→DNA析出→DNA鉴定 样品处理→粗分离→纯化(凝胶色谱法)→纯度鉴定(电泳法) 实验结果 获得较纯净的DNA 相对分子质量不同的蛋白质得以分离 实验意义 用于DNA分子的研究 用于蛋白质的研究与应用 考点四植物芳香油和胡萝卜素的提取 1.植物有效成分的提取的三种方法比较 提取方法 蒸馏法 有机溶剂 实验原理 利用将挥发性较强的植物芳香油携带出来 通过，压榨出果皮中的芳香油 使芳香油在有机溶剂中，蒸发溶剂获得芳香油 水蒸气 压榨法 萃取法 水蒸气 机械加压 溶解 方法步骤 ①水蒸气蒸馏②分离油层③除水过滤 ①石灰水浸泡、漂洗②压榨、过滤、静置③再次过滤 ①粉碎、干燥②萃取、过滤③浓缩 适用范围 适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油 适用于柑橘芳香油、柠檬芳香油等原料易焦糊芳香油的提取 适用范围广，要求原料的颗粒要尽可能细小，能充分浸泡在有机溶剂中 优点 简单易行，便于分离 生产成本低，易保持原料原有的结构和功能 出油率高，易分离 局限性 水中蒸馏会导致原料焦糊和有效成分水解等问题 分离较为困难，出油率相对较低 使用的有机溶剂处理不当会影响芳香油的质量 2.增加植物有效成分的提取量的关键措施 (1)蒸馏法提取植物芳香油： ①提取量主要取决于植物材料中芳香油的。 ②由于植物芳香油易挥发，因此用水蒸气蒸馏法提取植物芳香油时应选择植物材料(干燥后植物芳香油挥发)。 (2)压榨法提取植物芳香油：植物材料中的果胶、果蜡会影响压榨和出油率，压榨前通常采用石灰水浸泡的方法除去果胶、果蜡，以提高出油率。 含量 新鲜的 (3)萃取法提取植物有效成分： ①原料的颗粒大小会影响萃取的效果，因此通常采用粉碎的方法处理植物材料，以提高萃取效率。 ②含水量会影响萃取的效果，因此通常采用干燥的方法处理植物材料，以提高萃取效率。 1．(2014