低分子量肝素钙注射液无菌检查方法学验证.pdf

中国科技期刊数据库 科研 低分子量肝素钙注射液无菌检查方法学验证 孟宪丽 权健自然医学科技发展有限公司，天津 301707 摘要：本品规格为0.4m l：4000 IU。现按 中国药典》2015 年版四部通则1101 无菌检查法，进行本品无菌检查方法适用性试 验。批样品进行方法学验证试验，验证结果符合药典要求，样品检验结果符合规定。 关键词：无菌；验证；适用性试验 R927.11 A 167 1-5780(20 16)04-0 195-02 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： 低分子量肝素钙是一种新型的抗凝血酶Ⅲ(ATⅢ)依懒 菌液配制 性抗血栓形成药，对体内 外血栓，动 静脉血栓的形成有 ①取金黄色葡萄球菌 枯草芽孢杆菌 大肠埃希菌的新 抑制作用，本品能刺激内皮细胞释放组织因子凝血途径抑制 鲜培养物少许接种至胰酪大豆胨液体培养基中，生孢梭菌的 物，和纤溶酶原活化物，不被血小板第4 因子中和和和对血 新鲜培养物少许接种至硫乙醇酸盐流体培养基中，35℃培养 小板功能亦无明显影响。本品对血栓溶解有间接协同作用， 18～24 小时。 可用于治疗已形成的深部静脉血栓。 取经35℃培养 18～24 小时的金黄色葡萄球菌 枯草芽 1 试验环境 孢杆菌 大肠埃希菌肉汤培养物，用0.9%无菌氯化钠溶液稀 无菌检查应在无菌条件下进行，试验环境必须达到无菌 释制成每1ml 含菌数小于100cfu 的菌悬液。 检查的要求，检验全过程应严格遵守无菌操作，防止微生物 取经35℃培养 18～24 小时的生孢梭菌硫乙醇酸盐流体 污染，防止污染的措施不得影响供试品中微生物的检出。 培养基培养物，用0.9%无菌氯化钠溶液稀释制成每1ml 含菌 （1）无菌操作室 数小于100cfu 的菌悬液。 静态检测洁净度符合《GB/T16294-2010》10000 级要求。 ②取白色念珠菌新鲜培养物接种至沙氏葡萄糖液体培 动态检测以沉降4 小时计，沉降菌平均每皿菌落数为0 养基中，25℃培养24～48 小时。 个，小于3 个，符合 《GB/T16294-2010》对 10000 级洁净度 取经25℃培养24～48 小时的白色念珠菌沙氏葡萄糖液 静态检测的要求。 体培养基培养物，用0.9%无菌氯化钠溶液稀释制成每1ml 含 （2）超净工作台 菌数小于100cfu 的菌悬液。 静态检测洁净度符合 《GB/T16294-2010》100 级要求。 ③将黑曲霉新鲜培养物接种至沙氏葡萄糖琼脂斜面培 动态检测以沉降4 小时计，沉降菌平均每皿菌落数为0 养基上，25℃培养5～7 天，使大量孢子成熟。 个，小于1 个，符合 《GB/T16294-2010》对 100 级洁净度静 取25℃培养7 天的黑曲霉沙氏葡萄糖琼脂斜面培养物， 态检测的要求。 加入 3～5ml 含0.05% （v/v）聚山梨酯80 的0.9%无菌氯化 2 培养基 钠溶液，将孢子洗脱，吸出转移至空无菌试管作为原菌液， 培养基配制后应采用验证合格的灭菌程序灭菌，制备好 用含0.05% （v/v）聚山梨酯80 的0.9%无菌