7第五章第二节尿液蛋白质检查.pptVIP

尿液蛋白质检查 主讲 王宝峰 健康人尿液中蛋白质含量很少，仅为30—130mg/d，随意一次尿蛋白质为5—80mg/L。尿液蛋白质定性为阴性。若尿液蛋白质定性为阳性，即为Proteinuria。 根据蛋白质对肾小球的通过能力和分子量，人为 地分为大、中、小分子量蛋白质。 大分子量蛋白质：分子量〉9万的蛋白质，含量极微，包括由肾髓袢升支及远曲小管上皮细胞分泌的T-H糖蛋白及分泌型IgA等。 中分子量蛋白质：分子量为4—9万。是以白蛋白为主的血浆蛋白。 小分子量蛋白质：分子量〈4万，容易通过肾小球滤过，原尿中约含2—4g/d，绝大部分被肾小管重吸收，因此尿液中含量极少，如免疫球蛋白Fc片段、游离轻链、α1-微球蛋白、β2-微球蛋白。 Glomerular proteinuria : 白蛋白、 β2微球蛋白 2g/24h 尿液蛋白质的定性检验 尿液蛋白质的定量检验 尿液蛋白质电泳 尿液蛋白质检查的意义 蛋白尿的选择性 蛋白尿的选择性是判断肾小球损伤严重程度的指标 选择性蛋白尿 非选择性蛋白尿 选择性蛋白指数（SPI） SPI=（尿IgG/血清IgG）/（尿Alb/血清Alb） SPI0.1 选择性好 SPI0.2 选择性差 其他几种选择性蛋白指数 γ球蛋白/白蛋白：0.1高选择性蛋白尿 0.5非选择性蛋白尿 思考题：试分析比较急性肾小球肾炎和慢性肾盂肾炎患者的尿液特点。 * * 健康人尿中蛋白质以白蛋白为主，还有少量TH蛋白、分泌型IgA、 α1-微球蛋白、β2-微球蛋白等。 Tubluar proteinuria:β2微球蛋白、溶菌酶 1g/24h Mixed proteinuria： β2微球蛋白、白蛋白 Overflow proteinuria：血红蛋白、本周蛋白、肌红蛋白 Histic proteinuria:肾小管代谢产生的蛋白质，肾组织破坏分解的蛋白质，泌尿系统分泌的蛋白质 Accidental proteinuria Functional proteinuria, postural proteinuria 蛋白尿形成的原因和机制 ： 加热乙酸法：加热可使蛋白质变性凝固，加酸使蛋白质接近等电点，促使蛋白沉淀。灵敏度为0.15g/L，影响因素少。 磺基水杨酸法：在略低于蛋白质等电点的pH条件下，蛋白质带有正电荷的氨基与带负电荷的磺基水杨酸根相结合，形成不溶性蛋白沉淀。灵敏度0.05-0.1g/L，某些药物可以造成假阳性。 干化学试带法：蛋白质与溴甲酚蓝、四溴酚蓝二酯结合，蛋白质离子吸引带相反电荷指示剂，形成复合物发生颜色改变。只与白蛋白反应，不与球蛋白反应。 比浊法 磺基水杨酸 三氯乙酸 钨酸 氯化苄甲乙氧胺 氯化苯甲烃胺 双缩脲法：经典方法 通过加酸于尿液中使蛋白质沉淀而形成一定的浊度 碱性环境下，蛋白质与季胺盐结合形成不溶性沉淀 染料结合法 直接法 考马斯亮蓝G-250 邻苯三酚红 染料和蛋白质结合时，其最大吸收峰发生漂移 沉淀法 丽春红S 苯胺蓝 蛋白质与结合的染料在TCA的作用下共沉淀。然 后碱性环境使沉淀复溶，测定吸光度。 尿液标本 葡聚糖、聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纤维素、聚乙二醇 乙酸纤维膜电泳、琼脂或琼脂糖电泳、SDS电泳 胶体金、胶体银、考马斯亮蓝G-250染色 光密度计扫描、结果分析 生理性蛋白尿：体位性、功能性 病理性蛋白尿：肾前性、肾性、肾后性 蛋白尿的分类： 轻度蛋白尿 0.5g/24h 中度蛋白尿 0.5~4g/24h 重度蛋白尿 4g/24h 肾小球蛋白比（RGP）：SDS电泳 RGP=分子量为6.6万-9.0万的蛋白质量/分子量超过15万的蛋白质量 2选择性差；2~7 选择性一般 7 选择性好