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课题2
土壤中分解尿素的细菌的
分离与计数; 自然界筛选
寻找目的菌种时要根据它对________的要求，到______的环境中去寻找。
;课题背景 ;（一）筛选菌株 KH2PO4 1.4g
NaHPO4 2.1g
MgSO4 H2O 0.2g
葡萄糖 10.0g
尿素 1.0g
琼脂 15.0g
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL。
;（二）统计菌落数目：
1、活体计数法（稀释涂布平板）
（1）操作方法：
稀释涂布平板→统计菌落数
（2）原理：
当稀释度足够时，生长的菌落，1个菌落→1个活菌。
（3）统计原则
①选 30～300 个菌落的平板统计
②每个稀释度取3个平板取其平均值; 关注菌落的形态、大小、边缘、突起、颜色、
质地等等，都是区分细菌的重要手段。 ;2、显微镜直接计数;; 例：两位同学用稀释涂布平板法测定同
一土壤样品中的细菌数。从对应稀释倍数为
106的培养基中，得到以下两种统计结果。
1、甲同学在该浓度下涂布了一个平板，统计的菌落数为230。
2、乙同学在该浓度下涂布了A、B、C三个平板，统计的菌落数分别为21、212、256，该同学以这三个平板上菌落数的平均值163作为统计结果。
你认为这两位同学的作法正确吗？如果有问题，错在哪？;（二）统计菌落数目
1、活菌计数法
（4）统计结果：统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，因此统计结果一般用菌落数表示。
每克样品中的菌株数=（C/V)* M
C:某一稀释度下平板上生长的平均菌落数；
V:所用稀释液的体积；M:稀释倍数。;１．某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234，涂布平板时所用稀释液的体积为0.1mL，那么每克样品中的菌落数是 (??? )
A．2.34×108 B．2.34×109????????
C．234 D．23.4 ;（三）设置对照
1、设置对照的目的：
排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提??实验结果的可信度。
对照实验是指除了 被测试 的条件外，其他条件都 相同 的实验。;小结：通过这个事例可以看出，实验结果要有说服力，对照的设置是必不可少的。;2．1 根据图示2－7填写以下实验流程： ;
（六）鉴定：
鉴别培养基：不影响微生物的生存
酚红培养基：
原理：脲酶催化尿素分解成氨→培养基碱性增强→ 酚红变红→脲酶阳性
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