土壤中分解尿素的细菌的分离与计数上课用剖析
二.实验的具体操作 ㈠.土壤取样 从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层土3cm左右,再取样,将样品装入事先准备好的信封中。 ◆取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌。 (二)制备培养基: 制备以尿素为唯一氮源的选择培养基。 牛肉膏蛋白胨培养基(作对照) ◆应在火焰旁称取土壤10g。 ◆在稀释土壤溶液的过程中,每一步都要在火焰旁进行 ◆分离不同的微生物采用不同的稀释度 [三]土壤样品的稀释 ◆分离不同的微生物采用不同的稀释度 稀释倍数 目的 细菌 104、105、106 保证获得菌落数在30~300之间、适于计数的平板 放线菌 103、104、105 真菌 102、103、104 原因:不同微生物在土壤中含量不同 由于初次实验,对于稀释的范围没有把握,因此选择了一个较为宽泛的范围:稀释倍数为103~107。 由于初次实验,对于稀释的范围没有把握,因此选择了一个较为宽泛的范围:稀释倍数为103~107。每个稀释度下需要3个选择培养基,1个牛肉膏蛋白胨培养基,因此共需要15个选择培养基,5个牛肉膏蛋白胨培养基。此外,还需要准备8个灭菌的试管和1个灭菌的移液管。 为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度?测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量,选用的稀释范围相同吗? 原因:土壤中各类微生物的数量(单位:株/kg)是不同的。例如在干旱土壤中的
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