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专题2 微生物的培养与应用
课题1 微生物的实验室培养
1.培养基
(1)概念:人们按照微生物对________的不同需求,配制出供其________的营养基质。
(2)培养基的种类
(3)成分:
a.主要成分:水、________、氮源、________。
b.其他成分:还需要满足微生物对________、特殊营养物质以及________的要求。
c.请连线表示牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成:
牛肉膏 a.碳源、氮源和维生素 蛋白胨 b.碳源、氮源、磷酸盐和维生素 NaCl c.氢元素和氧元素 H2O d.无机盐 d.请连线完成其他培养基的特殊要求:
培养乳酸杆菌 a.将pH调至酸性 培养霉菌 b.pH调至中性或微碱性 培养细菌 c.培养基中添加维生素 培养厌氧微生物 d.需提供无氧条件 2.无菌技术
(1)目的:获得________培养物。
(2)关键:防止________的入侵。
(3)两种无菌技术的比较:
比较项目 消毒 灭菌 作用强度 ________的理化因素 ________的理化因素 作用程度 杀死物体表面或内部的________微生物 杀死物体表面或内部的______微生物 芽孢和孢子 一般不能杀灭 能杀灭 适用对象 操作空间、活体生物材料、操作者衣着和双手 操作工具、玻璃器皿、培养基等 常用方法 ___________消毒法、___________消毒法、___________消毒法、___________消毒法 ________法、________灭菌法、________灭菌法 ??3.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基
计算:根据培养基________的比例,计算培养基中各成分的用量
↓
称量:牛肉膏比较________,可放在________上称取。易吸潮,称取时动作要迅速,称后要及时盖上瓶盖
↓
溶化:牛肉膏和称量纸+水取出称量纸加蛋白胨和氯化钠加________(注意:要不断用玻棒搅拌,防止琼脂糊底而导致烧杯破裂)补加蒸馏水至100 mL
↓
灭菌:对培养基进行________灭菌
↓
倒平板:待培养基冷却至50°C左右时,在________附近倒平板
?4.平板划线法纯化大肠杆菌:
(1)原理:通过________在琼脂固体培养基表面连续________的操作,将聚集的菌种逐步稀释________到培养基的表面。
(2)操作步骤:
5.稀释涂布平板法纯化大肠杆菌:
(1)原理:将菌液进行一系列的________,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。
(2)涂布平板操作步骤:
涂布器消毒:将涂布器浸在盛有________的烧杯中消毒
↓
取菌液:取少量菌液(不超过0. 1mL),滴加到________表面
↓
涂布器灭菌:将沾有少量酒精的涂布器____,待酒精燃尽后,冷却8?10 s
↓
涂布平板:用涂布器将菌液均匀地________在培养基表面。涂布时可转动培养皿,使菌液分布均匀
6.菌种保藏
比较项目 临时保藏 甘油管藏 适用范围 _______的菌种 ________的菌种 培养基 _______培养基 ________培养基 保藏温度 4°C -20°C 具体方法 接种到固体斜面培养基上→适宜温度下培养→4°C冰箱中保藏 甘油瓶中装入甘油后灭菌→将菌液转移至甘油瓶中→混匀后冷冻箱中保存 【课前小测】
1.判断正误:培养基分装到培养皿后进行灭菌。
2.判断正误:从有机废水中分离分解有机物的微生物时,接种后的培养皿需要放在光照培养箱中培养。
3.判断正误:培养基中只要含有水、碳源、氮源和无机盐四种成分就能满足各种微生物的需要。
4.判断正误:无菌技术只是为了防止杂菌感染培养物。
5.判断正误:平板划线操作中,接种结束后灼烧接种环的目的是杀死接种环上原有的微生物。
1.(1)营养物质? 生长繁殖
(2)液体? 凝固剂? 固体
(3)a.碳源? 无机盐??? b.pH? ?氧气???? c.—b ?②—a ? ?③—d ?④—c
d.—c? ?②—a ? ?③—b?? ④—d
2.(1)纯净??? (2)外来杂菌? (3)温和? 强烈? 部分? 所有? 煮沸? 巴氏? 化学药剂? 紫外线? 灼烧灭菌? 干热? 高压蒸汽?
3.配方? 黏稠? 称量纸? 琼脂? 高压蒸汽? 酒精灯火焰
4.(1)接种环? 划线? 分散
(2)火焰旁? 棉塞? 火焰? 冷却? 通过火焰? 三至五? 不要划破培养基? 划线的末端? 第一区划线? 倒置
5.(1)梯度稀释
(2) 酒精? 培养基? 在火焰上引燃? 涂布
6.频繁使用? 长期保存? 固体斜面? 液体
【课前小测】
1.×2.×3.×4.×5.×
培养基的配制原则
(1)目的要明确:配制
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