广东省汕头市2016-2017高中生物 第一章 基因工程 1.1 DNA重组技术的基本工具课件 新人教版选修3.ppt

一、基因工程的定义 二、基因工程的理论基础 1.1 DNA重组技术的基本工具 （工欲善其事，必先利其器） 1、限制性核酸内切酶（限制酶）—“分子手术刀” （1）来源:主要从原核生物中分离出来。 1.1 DNA重组技术的基本工具 （工欲善其事，必先利其器） （2）作用 1、限制性核酸内切酶（限制酶）—“分子手术刀” 识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 1.1 DNA重组技术的基本工具 （工欲善其事，必先利其器） （2）作用 1、限制性核酸内切酶（限制酶）—“分子手术刀” 识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 1.1 DNA重组技术的基本工具 （工欲善其事，必先利其器） （2）作用 1、限制性核酸内切酶（限制酶）—“分子手术刀” 1.1 DNA重组技术的基本工具 （工欲善其事，必先利其器） （2）作用 1、限制性核酸内切酶（限制酶）—“分子手术刀” 1.1 DNA重组技术的基本工具 （工欲善其事，必先利其器） （3）特点 1、限制性核酸内切酶（限制酶）—“分子手术刀” 常用的DNA限制性内切酶的专一性 酶 识别序列的序列和切口 特点 ‥ ‥A G C T ‥‥ ‥ ‥T C G A ‥ ‥ ‥ ‥G G A T C C ‥‥ ‥ ‥C C T A G G ‥‥ ‥ ‥A G A T C T ‥‥ ‥ ‥T C T A G A ‥‥ ‥ ‥G A A T T C ‥‥ ‥ ‥C T T A A G ‥‥ ‥ ‥A A G C T T‥‥ ‥ ‥T T C G A A ‥‥ ‥ ‥G T C G A C ‥‥ ‥ ‥C A G C T G ‥‥ ‥ ‥C C C G G G ‥‥ ‥ ‥G G G C C C ‥‥ Bam H I Alu I Bgl I Eco R I Hind Ⅲ Sal I Sma I 四核苷酸，平端切口 六核苷酸，平端切口 六核苷酸，粘端切口 六核苷酸，粘端切口 六核苷酸，粘端切口 六核苷酸，粘端切口 六核苷酸，粘端切口 1.1 DNA重组技术的基本工具 （工欲善其事，必先利其器） （4）结果 1、限制性核酸内切酶（限制酶）—“分子手术刀” 1.1 DNA重组技术的基本工具 （工欲善其事，必先利其器） 2、DNA连接酶—“分子缝合针” 酶的种类 作用底物 作用实质 形成产物 限制酶 DNA连接酶 DNA聚合酶 DNA解旋酶 与DNA几种有关的四种酶 酶的种类 作用底物 作用实质 形成产物 限制酶 DNA分子 切断磷酸 二酯键 段DNA片段 (平末端或黏性末端） DNA连接酶 DNA分子片段 形成磷酸 二酯键 重组DNA分子 DNA聚合酶 脱氧核苷酸 形成磷酸 二酯键 与亲代DNA分子相同的DNA分子 DNA解旋酶 DNA分子 断开碱基对之间的氢键 形成单链DNA 与DNA几种有关的四种酶 1.1 DNA重组技术的基本工具 （工欲善其事，必先利其器） 3、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车” （1）载体的作用 （2）载体需要具备的条件 （3）常见的载体 重组质粒 1.1 DNA重组技术的基本工具 （工欲善其事，必先利其器） 3、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车” （1）载体的作用 携带目的基因进入受体细胞，使目的基因在受体细胞中稳定存在并表达。 1.1 DNA重组技术的基本工具 （工欲善其事，必先利其器） 3、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车” （2）载体需要具备的条件 ①能够在受体细胞中复制并稳定保存。 ②有一至多个限制酶切位点，便于与目的基因相连。 ③具有标记基因（抗生素抗性基因、荧光蛋白基因），便于检测目的基因是否导入受体细胞。 1.1 DNA重组技术的基本工具 （工欲善其事，必先利其器） 3、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车” （3）常见的载体 质粒：存在于细菌、酵母菌等拟核DNA或核DNA外的，能够自主复制的小型环状DNA。 此外还有：λ噬菌体的衍生物、动植物病毒。