酶反应原理.pptVIP

四、酶活性测定 1、酶活性 酶的催化能力，以酶促反应速度来衡量。 2、酶活性单位 指酶促反应在单位时间（s,min,h）内生成一定量（mg, μg, μmol）的产物或消耗一定量的底物所需的酶量。 一个国际单位（IU ,1976年）：在特定条件下, 1 min内使底物转变 1μmol所需的酶量； 一个催量（kat）：在特定条件下,1 Sec内使底物转变 1mol所需的酶量 1I.U.=16.67?10 -9 kat=16.67 ? 10 -3 ?Kat； 1Kat =6?10 7 I.U. 酶比活：每毫克蛋白所含有的每活力单位数。 3、酶活力测定 包括两个阶段： 反应阶段和测定阶段。 一般采取如下步骤： (1) 根据酶的专一性，选择适宜的底物，并配制成一定浓度的底物溶液。 要求底物均匀一致，具有一定的纯度，新鲜配制。 （ 2 ）确定酶促反应的温度，pH 值等条件。 温度可选酶反应最适温度 pH 值应是酶促反应的最适 pH 值反应条件在反应过程中应尽量保持恒定不变。 (3)酶液与底物溶液在规定状态下混合开始反应。 (4)适时测定产物的生成量或底物的减少量。 终止酶反应的方法 ①加热失活：酶反应时间一到立即取出适量的反应液，置于沸水浴中； ②变性失活：酶反应时间一到立即加入适宜的酶变性剂，如三氯醋酸等； ③酸碱失活：酶反应时间一到