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阜阳师范学院化学化工学院 答辩人： 马菲菲 学号： 200840710323 指导老师：张宏 2012年学士论文答辩 答辩题目：血红蛋白在{AuNPs/Hb}n层层组装薄膜电极中的直接电化学研究 一、选题的背景及意义 1、背景 生命科学电化学界非常关注的热点问题之一。而蛋白质的直接电化学是在电极表面将蛋白质分子直接固定，使电极能与具有蛋白质的氧化还原活性中心进行直接交流，从而能够更易更快地进行电子传递。 2、研究意义 能量转换、物质代谢、开发新型生物传感器、生物反应 器，解析蛋白质的结构及其物理化学性质，电子转移机理和生理作用 二、国内外研究现状 Farmer等利用DDAB 薄膜修饰电极研究了Mb 对NO2-和NO 的催化还原机理。 Kong等研究了辣根过氧化物酶( HRP) 在DDAB 薄膜电极上的可逆电化学行为。 何亚楠等利用十二烷基硫酸钠作为促进剂在裸银电极上测定血红蛋白，得到很好的电流响应 三、论文内容 本文采用柠檬酸钠还原氯金酸法制备了40nm的金纳米粒子，用制得的金纳米粒子制作化学修饰电极，在此过程中，首先在玻碳电极上吸PEI/PSS/PEI聚离子作为前驱膜，再利用自组装技术和静电吸附作用,将带负电的金纳米粒子和带正电荷的血红蛋白分子进行层层组装 四、具体实验过程 第一步：纳米金溶胶的制备： 第二步：热解玻碳电极的打磨 第三步：金纳米粒子与血红蛋白层层组装膜的构筑 第四步：将制备好的{Au/Mb}n薄膜电极置于ph=7的PBS缓冲溶液中进行循安扫描 五、结果 金纳米粒子及表征 {AuNPs/Hb}n 薄膜在pH=7.0空白缓冲溶液中的CV 图 K3[Fe(CN)6]/K4[Fe(CN)6]电对在裸电极的循环伏安曲线图 {AuNPs/Hb}n 薄膜在pH=7.0空白缓冲溶液中的CV 图 {AuNPs/Hb}n 薄膜在pH=7.0空白缓冲溶液中的CV 图 {AuNPs/Hb}n 薄膜在pH=7.0空白缓冲溶液中的CV 图 {AuNPs/Hb}n 薄膜在pH=7.0空白缓冲溶液中的CV 图 {AuNPs/Hb}n 薄膜在pH=7.0空白缓冲溶液中的CV 图 {AuNPs/Hb}n 薄膜在pH=7.0空白缓冲溶液中的CV 图 {AuNPs/Hb}n 薄膜在pH=7.0空白缓冲溶液中的CV 图 {AuNPs/Hb}n 薄膜在pH=7.0空白缓冲溶液中的CV 图 {AuNPs/Hb}n 薄膜在pH=7.0空白缓冲溶液中的CV 图 {AuNPs/Hb}n 薄膜在pH=7.0空白缓冲溶液中的CV 图 六、图形结果分析 由图可知：随着组装层数的增加, 血红蛋白的峰电流逐渐增大, 当组装第三层的时候, 峰电流与第二层峰电流接近，但相对裸电极，其峰电流都明显增大, 这说明纳米金可以促进血红蛋白与电极间的电子传递,此修饰电极很好地催化了血红蛋白的氧化还原。 不足分析 但我们从图上结果发现，Au纳米粒子与Mb的层层组装膜有明显的还原峰，而氧化峰不明显，原因可能是： ①在实验过程中没有始终保持氮气氛围，导致有氧气进入，从而使血红蛋白与金纳米粒子层层组装膜被空气中的氧化性物质（主要指氧气）氧化 ②血红蛋白放置时间太长，已经失去部分活性 08级化学（3）班马菲菲 阜阳师范学院化学化工学院 大学本科的学习生活即将结束。在此，我要感谢所有曾经教导过我的老师和关心过我的同学，他们在 我成长过程中给予了我很大的帮助。 本文能够顺 利完成，要特别感谢我的指导老师张宏老师，感谢各位化学化工学院的老师的关心和帮助。 最后向所有关心和帮助过我 的人表示真心的感谢。 * 阜阳师范学院化学化工学院 *