新城疫分离毒HN蛋白的抗原性初步分析与分子特性研究.PDFVIP

微生物学通报 JAN 20, 2008, 35(1) 87~93 Microbiology ©2008 by Institute of Microbiology, CAS tongbao@ 研究报告 新城疫分离毒 HN 蛋白的抗原性初步分析 及分子特性研究 姚春峰 仇旭升 刘文博 顾 敏 吴 双 曹永忠 刘秀梵* ( 225009) 摘 要: 运用针对 NDV 囊膜糖蛋白(HN)的单克隆抗体(MAbs), 对 2005~2006 年间自我国江苏和 广西部分地区的20 株NDV 分离株进行排谱试验, 初步分析了不同毒株之间HN 蛋白的抗原表位 差异; 并应用RT-PCR 技术成功扩增了其 HN 基因整个编码区, 经克隆、测序最终获得 13 株鸡源 NDV 与 7 株鹅源 NDV HN 基因的编码区序列, 分析测定核苷酸序列及推导的氨基酸序列, 并将 鹅源 NDV 与鸡源 NDV 相应序列进行了比较。结果单抗排谱试验表明, 20 株 NDV 分离株之间 HN 蛋白的抗原表位存在差异; 测序结果表明, 测定的HN 基因的编码区长度皆为 1716nt 编码571 个氨基酸; 分离株中 18 株基因Ⅶ型 NDV 分离株之间 HN 基因编码区核苷酸序列具有较高的同 源性, 达 94.8%~100%; 与近几年国内流行的其它基因Ⅶ型 NDV 之间的核苷酸序列同源性 为92.1%~99.6% 。对其推导的HN 蛋白一级结构中潜在的糖基化位点及 HN 蛋白细胞受体结合相 关区域的氨基酸序列等进行了比较分析。结果显示, 单抗排谱差异显著株在部分氨基酸位点发生 了突变; 同时揭示我国部分地区同期流行的鹅源NDV 与鸡源NDV HN 基因之间具有较近的亲缘 关系。 关键词: 新城疫病毒, 单克隆抗体, HN 基因, 序列分析 Genetic Characterization and Antigenic Analysis of Hemagglutinin-neuraminidase Glycoprotein of Newcastle Disease Virus Isolates YAO Chun-Feng QIU Xu-Sheng LIU Wen-Bo GU Min WU Shuang CAO Yong-Zhong LIU Xiu-Fan* (Key Laboratory of Animal Infectious Diseases of Ministry of Agriculture, Yangzhou University, Yangzhou 225009) Abstract: Twenty Newcastle disease virus (NDV) strains were isolated from diseased chicken and geese in field outbreaks during 2005 and 2006 in some regions of Jiangsu and Guangxi, and the antigenic analysis of the all NDV isolates had been done based on the reaction spectrum with a pa