香菇多糖和黄芪多糖对鲤免疫细胞的活性和IL-1β体外诱生表达的影响要点分析.pdfVIP

维普资讯 第32卷第4期 水 产 学 报 Vo1．32，NO．4 2008年 7月 JOURNALOFFISHERIESOFCHINA July，2008 文章编号 ：1000—0615(2008)04—628—08 香菇多糖和黄芪多糖对鲤免疫细胞 的活性和 IL一1 体外诱生表达的影响 曹丽萍 ，丁炜东 ，张 柳 ，GalinaJenef，徐 跑 ，殷国俊 (1．中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部水生动物遗传育种和 养殖生物学重点开放实验室，江苏 无锡 214081； 2．华中农业大学水产学院，湖北 武汉 430070； 3．ResearchInstituteforFisheries，AquacultureandIrrigation，Annalight8，SzarvasH～4440，Hungary) 摘要：为了探讨香菇和黄芪多糖对鲤免疫细胞的免疫活性作用，采用Percoll密度离心等技 术，对鲤的头肾巨噬细胞和外周血 白细胞进行分离纯化，并离体培养，从细胞和分子水平上研 究了香菇和黄芪多糖的免疫调节作用。巨噬细胞和外周血 白细胞分别体外暴露不同浓度 的黄 芪多糖和香菇多糖后，采用MTT法测定它们对鲤外周血 白细胞增殖的影响；NBT还原法和 Griess试剂显色法测定对头肾巨噬细胞的呼吸爆发的影响；实时定量 PCR法测定头肾巨噬细 胞细胞因子IL-113诱导表达的影响。结果显示，黄芪和香菇多糖作用头肾巨噬细胞24h后，香 菇多糖浓度为 1，10，100 g·mL 时能显著诱导巨噬细胞的氧爆发活性，黄芪多糖则没有显著 的诱导作用；黄芪和香菇多糖作用头肾巨噬细胞 96h后，香菇多糖低浓度时对细胞的氮呼吸 爆发活性无显著影响，黄芪多糖浓度 10 g·mL 能显著诱导氮呼吸爆发活性，而在浓度为 1000 g·mL 两者均表现为高浓度抑制作用；两者作用外周血 白细胞 24h后，香菇多糖浓度 为100，1000 g·mL 和黄芪多糖浓度为 10，100 g·mL 时都能显著促进鲤外周血淋 巴细 胞的增殖；两种多糖作用头肾巨噬细胞 24h后能显著增强 IL-I~I的体外诱导表达。结果表明 黄芪多糖和香菇多糖对离体培养鲤免疫细胞有明显活性作用，对鲤非特异性免疫和特异性免 疫具有促进作用。 关键词：鲤；多糖；巨噬细胞；IL-I~ 中图分类号 ：S963．73 文献标识码 ：A 近年来，大规模高密度水产养殖造成的水环 免疫增强剂是替代或减少抗生素预防鱼病 的另一 境污染，致使水产病害 日趋严重，特别是病毒性疾 种有效手段 ，它主要通过非特异性免疫应答来增 病造成的损失更加惊人 。为了防治水产动物疾 强鱼类的免疫抗病力。与免疫接种相 比，它适用 病 ，抗生素被大量应用于水产养殖，由此引起的抗 于多种鱼类，并可 以控制多种疾病 。20世纪 80 药性和药物残留等问题使得抗生素的使用在国内 年代 以来，国外学者已发现 10多种天然和人工合 外许多国家都受到越来越严格的限制。因此寻求 成的物质可 以促进水产动物的非特异性免疫应 能有效防治水产动物疾病、替代或减少抗生素在 答，从而增强其抗病力口 ]。近年来我 国在此方 水产养殖上使用的药物就显得非常必要和紧迫 。 面的研究也 日益增加，其中对多糖的研究最为广 收稿 日期：2007—11—11 资助项 目：中匈(牙利)国际合作项 目(第三期)(CHN一27／2006)；国际科学基金 (AAI3611一R)；中央级公益性科研院所基本科研 业务费专项资金(中国水产科学研究院淡水渔业研究中心)资助项 目(2007JBFA06，2007JBFC05) 作者简介 ：曹丽萍(1977～)，女，江