第一次课文稿.pptVIP

生物化学大实验 1.纪律要求 同其他课程一样，要求不迟到、不早退（提前10分钟到实验室），上课时间，一律关掉手机（或调成静音），不允许接打手机、收发短信等。任何情况下不得耽误上课，如确实有事，一定要在4次实验课中调开。无论因何种原因耽误一次课，扣除本次课成绩。 2.实验课的特点 2.1实验的综合性强： 与上学期的“生物化学实验”做一下对比，生化大实验的每一个实验项目都是综合性实验，需要3-4周，甚至更长时间。实验内容多，包含的实验技术多，多种实验技术综合在一起才能完成一个实验，通过每一个实验项目的完成，可以锻炼大家对所学知识的综合运用能力。 回忆上学期我们学习的内容： 我们分别学习了氨基酸、蛋白质的颜色反应、Folin-酚法测定蛋白质浓度、凯氏定氮法测定生物样品的蛋白质含量、氨基酸的纸层析、凝胶电泳测定蛋白质的相对分子质量、温度对糖化酶活力的影响、微生素C的提取及测定、糖的呈色反应、转氨酶活力测定等等。 每一个实验都是独立的，仅包含一种实验技术，相互之间没有联系。 在生化大实验课程里，我们把一些以前学过的、没有学过的生化技术综合起来，设计了几个综合性实验，每一个实验项目都是由若干个相互联系的部分组成，实验前后步骤联系紧密，前边的操作和结果直接影响后续操作及结果。 例如：实验一，鸡卵类粘蛋白的提取纯化、活性及分子量测定。 原材料是鸡蛋清，先采用有机溶剂沉淀的方法去除大量杂蛋白（卵清蛋白、球蛋白），称为粗提，再利用有机溶剂沉淀得到鸡卵类粘蛋白粗品，再采用离子交换纤维素柱层析进行纯化，回收纯化组分，测定生物活性，计算纯化效率，最后以聚丙烯酰胺凝胶电泳测定其相对分子质量。 该实验包含以下实验原理、技术及仪器使用： （1）有机溶剂沉淀蛋白质； （2）冷冻离心（冷冻离心机）； （3）透析（透析袋）； （4）蛋白质浓度测定（可见分光光度计）； （5）离子交换柱层析（核酸蛋白检测仪）； （6）活性测定（紫外分光光度计）； （7）相对分子质量测定（电泳仪）。 在粗提步骤，如果有机溶剂的比例和加量不合适，不但会使杂蛋白沉淀，目的蛋白也会共同沉淀，这样导致收率降低，柱层析纯化的条件不合适，会导致纯化效果差，电泳检测时，样品图谱会有差异。 要求：每一次、每一个步骤都要认真，否则，很可能实验进行到一半，某些组就难以继续下去。 2.2上课时间： 由于生物材料的特殊性，每次上课的时间不可能完全受课表安排的限制，每一次上课时间的长短，要根据实验的具体情况调节，有时候还要占用一些其他时间。提前来，或中午接着做，或前一天做些准备，都有可能。 3.本实验课的主要内容 生命科学学院对生工和生技专业，在学习生物化学实验之后，还安排了综合实验课－－生化大实验，目的就是让同学们学习了生物化学基础知识和基本技术之后，进一步掌握这些技术的运用，如何将这些生物化学原理和技术运用到科研实践当中。 我们为大家选择的实验包括蛋白质（或酶）的提取、纯化、活性测定、分子量测定，亲和层析纯化丝氨酸蛋白酶、酶的固定化及性质、蛋白质的免疫印迹等。 每一个综合性实验相当于一个小型毕业实践的课题。 4.实验报告要求 4.1一个综合性实验完成后写一份实验报告。 4.2由于实验的综合性，以往实验报告的格式已经不适合生化大实验。 本课程实验报告要求按研究论文的格式书写。包括：题目、作者、中文摘要、英文摘要、前言、材料与方法、结果与讨论、参考文献。 4.3 每一部分的要求 题目：每一次实验的题目 作者：一个综合性实验的合作者（4位同学） 单位：河北大学生命科学学院 河北 保定 中文摘要及关键词：总结本次实验的主要内容、最核心的专业词语。 英文摘要及关键词：翻译成英文。 前言：写明本研究的对象有什么性质、用途、研究其的重要意义以及目前的研究水平等。 材料与方法：详细写明所用材料及实际采用的方法。分条目写。 如： 1 材料与方法 1.1 材料 新鲜鸡蛋、丙酮、三氯乙酸-丙酮（比例）、透析袋、DEAE-纤维素、、、 1.2仪器 冷冻离心机、可见分光度计、、、、 1.3 方法 1.3.1 鸡卵类粘蛋白的粗提 1.3.2 鸡卵类粘蛋白的纯化 1.3.3 鸡卵类粘蛋白浓度测定 1.3.4 鸡卵类粘蛋白活性测定 1.3.5 鸡卵类粘蛋白相对分子质量测定 结果与讨论：与方法相对应，写明采用每一种方法得到了什么结果，可以列表、绘图、图片等形式表示。对得到的结果进行一下分析和评价。 2 结果与讨论 2.1 粗提结果 写明？体积鸡蛋清，得到？？体积黄绿色上清液，沉淀、溶解、透析后得到？？体积粗品。 2.2 2.3 参考文献：写明你完成本次实验阅读了哪些文献，包括书、杂志、电子出版物、专利、论文集等。 例如： 1. 邵雪玲，毛歆，郭清.生物化学与分子生物学实验指导.武汉大