不同营养元素限制对圆红冬胞酵母油脂生产地影响.PDFVIP

中国生物工程杂志　ＣｈｉｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１６，３６（１１）：１６２２ ＤＯＩ：１０．１３５２３／ｊ．ｃｂ 不同营养元素限制对圆红冬胞酵母油脂生产的影响 １，２ １ １ １ 王雅南 　沈宏伟 　杨晓兵 　赵宗保 （１中国科学院大连化学物理研究所生物技术部　大连　１１６０２３　２中国科学院大学　北京　１０００４９） 摘要　以产油酵母圆红冬胞酵母（Ｒｈｏｄｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍｔｏｒｕｌｏｉｄｅｓ）作为研究对象，系统地研究了氮、磷、 硫限制对其油脂积累的影响，并在３Ｌ生物反应器上考察了Ｒ．ｔｏｒｕｌｏｉｄｅｓ在Ｃ／Ｐ摩尔比为１１３３．３ 时初始葡萄糖浓度对油脂生产的影响。结果表明：氮、磷、硫中任意一种营养元素受限，均能促使 Ｒ．ｔｏｒｕｌｏｉｄｅｓ在胞内积累高于自身干重６０％的油脂；通过改变培养基的组成，可以调节油脂中脂 肪酸的构成，使油脂中饱和脂肪酸比例高于７０％或不饱和脂肪酸比例高于６０％。就油脂生产强 度及转化效率而言，磷限制优于氮限制或硫限制。当Ｃ／Ｐ摩尔比相同时，初始葡萄糖浓度越低越 有利于油脂生产。对采用不同原料生产微生物油脂的技术有一定指导意义。 关键词　油脂酵母　微生物油脂　营养限制　圆红冬胞酵母 中图分类号　Ｑ９３３３ 　　随着化石能源、资源的过量消耗，能源短缺、资源 响进行较为系统的比较，特别是没有在发酵罐水平上 匮乏和环境污染等问题日益凸显。为此，世界各国的 对相同磷限制条件下不同初始碳源浓度对油脂生产的 ［１］ 影响进行研究。本文通过考察不同营养限制对 Ｒ． 研究者不断挖掘可再生、环境友好型燃料 。生物柴 油与化石燃料性质相近，但排放的污染气体远低于化 ｔｏｒｕｌｏｉｄｅｓ油脂生产的影响，为微生物油脂的工业化生 ［２］ 产提供参考。 石柴油，是最为理想的生物燃料之一 。当前生物柴 油的原料主要来自于动物、植物油脂，但其生产受时 １　材料与方法 间、地点及气候变化的影响，很难满足生物柴油的大量 需求。与传统的动物、植物油脂相比，微生物油脂具有 １．１　供试菌株 ［３］ 　　圆红冬胞酵母ＲｈｏｄｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍｔｏｒｕｌｏｉｄｅｓＡＳ２．１３８９ 生产周期短、生产潜力大、可连续供给等优点 。研究 发现，营养限制，如氮限制、磷限制、硫限制和铁限制 购自中国普通微生物菌种保藏管理中心（ＣＧＭＣＣ）。 等，能够促使更多的碳代谢流进入油脂合成途径［４７］。 １．２　培养基 　　最近，利用产油酵母生产微生物油脂已受到广泛 　　ＹＥＰＤ液体培养基：葡萄糖２０ｇ／Ｌ，酵母粉 １０ｇ／Ｌ， ［８］ 蛋白胨１０ｇ／Ｌ。固体培养基在ＹＥＰＤ液体培养基基础 关注 。圆红冬胞酵母（Ｒｈｏｄｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍｔｏｒｕｌｏｉｄｅｓ）是最 优良的产油酵母之一，其油脂含量高，底物范围广，生 上加入１５ｇ／Ｌ琼脂粉。Ｃ／Ｎ摩尔比为３．６，Ｃ／Ｐ摩尔比 ［９１２］ 为１３０。 长速率快 。研究人员已经完成 Ｒ．ｔｏｒｕｌｏｉｄｅｓ基因 　　发酵培养基： 氮限制培养基，葡萄糖５０．０ｇ／Ｌ、 组、转录组、蛋白质组等多个组学数据的采集与分析， ① ［１３１５］ ＮａＨＰＯ ·１２ＨＯ１．０ｇ／Ｌ、ＫＨＰＯ １．０ｇ／Ｌ、ＭｇＳＯ · 并构建了相关的遗传操作平台