蛋白质组学技术课件.pptVIP

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  • 2017-06-07 发布于河南
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Proteomics ——Proteomics techniques 研究方向:分子免疫学 蛋白质组学技术 一、蛋白质分离技术 二、蛋白质鉴定技术 三、蛋白质相互作用研究 蛋白质组的分离技术 1、双向聚丙烯酰胺凝胶电泳 2D、双向荧光差异凝胶电泳( two-dimensional fluorescence difference gel electrophoresis,2D-DIGE) 双向荧光差异凝胶电泳 2D-DIGE技术最早在1997年由Jon Minden实验室提出,后来Amersham成为此项技术的主要推动者。 技术路线:将样品在电泳前标记Cy2、Cy3 和Cy5 这3 种荧光染料,然后将标记后的3 种样品混合, 同时在一块胶上进行电泳。由于不同的荧光标记样品有不同的激发波长,可通过不同的滤光片得到不同颜色荧光信号,根据这些信号的比例来判断样品之间蛋白质的差异。 Workflow of DIGE 内标:为实验中的每张胶上的每个蛋白质都提供一个参考点。理想情况下,内标中最好含有来源于所有样本的每一个蛋白质。最好的办法就是将所有的样本等量混合来形成内标。 7、First dimension IEF 8、Second dimension SDS、Gel Imaging 10、DecyderTM 11、Pro

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