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- 2017-06-07 发布于河南
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前言 蛋白质工程可分为上游加工过程和下游加工过程。 上游加工过程(Up Sream Procession)主要包括育种、细胞培养和筛选、基因工程等。 下游加工过程( Down Sream Procession )主要包括对生物技术初级制品的提取、浓缩、分离纯化等。 下游加工过程往往是经济效益的关键,一般占总成本的60%——90%。 液相色谱技术是生物下游加工过程中被广泛应用的一种高效分离纯化技术。 1.7.5 疏水作用色谱 疏水作用色谱是利用表面联结弱疏水性基团的疏水性分离介质为固定相,根据蛋白质与疏水性分离介质之间的疏水性相互作用的差别来实现生物大分子分离纯化的色谱技术。 由于蛋白质表面的疏水性各不相同,蛋白质分子表面某一疏水区域与分离介质表面的疏水性配基会产生一定的疏水作用,引起生物大分子在分离介质表面的吸附力的差异,从而达到分离目的。 值得注意是疏水作用分离机理和操作与离子交换色谱互补,可与离子交换色谱耦合使用 3. 离子交换色谱分离蛋白质主要取决于各种蛋白质所带净电荷,分为阳离子和阴离子交换色谱。在进行离子交换色谱时,时刻要想到这样的原则:处于等电点(pI)的蛋白质所带净电荷为零;当蛋白质所处溶液pH pI时,该蛋白质带负电荷,如果pH pI时,蛋白质带正电荷。 一般是低离子浓度下吸附,高离子浓度下洗脱。 4. 疏水作用色谱是根据蛋白质与疏水性分离
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