第14章微生物药物制造工艺.pptVIP

* Waksman于1952年获得诺贝尔生理学奖金,贡献在于发现链霉素(1944),并系统地提出了抗生素产生菌的分离方法,抗生素一词的发明者.图从左到右分别为瓦克斯曼,链霉菌和链霉素 * 半合成抗生素： 6-氨基青霉烷酸（6-APA） 7-氨基头孢烷酸（7-ACA） * 多柔比星（阿霉素）：抗肿瘤 巴龙霉素：抗原虫 研究中的新的抗肿瘤抗生素，埃波霉素 * 另一个微生物药物发展史上做出卓绝贡献的是日本学者梅泽滨夫(H.Umezawa) ，率先从微生物产物中分离筛选到多种生理活性物质 * 按照抗生素的作用对象分类便于应用时参考。某些抗生素的抗菌谱较广，例如四环素和氯霉素等能抑制几类微生物，也有作用特异性很专一的抗生素，如青霉素G对革兰氏阳性细菌有效 * 按作用机制分类，对理论研究具有重要的意义 * 上图为小单孢菌 下图为海洋微生物 * PKS I主要由酮基合成酶(ketosynthase,KS)、酰基转移酶（acyltransferase，AT）、脱氢酶（de-hydratase，DH）、烯醇还原酶（enoylreductase，ER）、酮基还原酶（ketoreductase，KR）和酰基载体蛋白（a-cyl-carrier-protein，ACP）等功能域组成，KS，AT和ACP是链延伸反应最小的PKS。 将红霉素PKS模块3的KR转换为来自西罗莫司PKS模块4的DH-KR，得到一个含C=C双键的新化合物 将红霉素PKS模块7的AT转换为来自于西罗莫司PKS模块3的AT，产生缺少一个甲基的新化合物 （引自：顾觉奋. 生物合成聚酮类药物研究进展，中国新药杂志，2006，15（19）：1620） 5、成盐： 与磷钨酸、苦味酸、甲基橙等成盐沉淀，用于鉴别 与磺酸、羧酸、磷酸酯成盐，可溶于有机溶剂中，可用于溶媒萃取法。 与某些盐形成复盐，用于精制，如： 链霉素盐酸盐与氯化钙（在甲醇中）形成复盐，从甲醇中析出。复盐溶于水，可通过阴离子交换树脂（SO4）转为硫酸盐。 (二）、链霉素的制备 p585 影响工艺的因素 1.发酵液的过滤处理 2 树脂的吸附、洗脱 3 活性炭脱色、低温浓缩 三、大环内酯类抗生素 （一）、概述： 结构特点：以大环内酯为母体 共性： 1、无色弱碱性化合物 2、微溶于水，在水中溶解度随温度上升而下降 3、酸性条件苷键易水解，碱性内酯环易破坏 （二）、红霉素的主要性质 1、酸碱性：二甲氨基呈碱性 2、溶解性：易溶于醇、丙酮、氯仿、酯，微溶于乙醚和水，在水中溶解度55℃时最小 3、稳定性：pH6~8最稳定 （三）、制备工艺 工艺要点：发酵液的预处理和过滤；树脂的吸附、洗涤和解吸、反萃取、结晶 四、四环类抗生素 （一）、概述 结构上都含有四并苯母核 （二）、四环素性质 1、溶解性： 在pH4.5~7.5之间难溶于水 游离碱能溶于吡啶、甲醇、丁醇等有机溶剂和稀酸、稀碱 盐酸盐能溶于水，不溶或微溶于有机溶剂 2、稳定性： 干燥低温稳定 水溶液碱性条件下不稳定，酸性条件下（pH4~5）较稳定 3、化学反应： 差向异构化：弱酸性pH2~6 脱水反应：较强酸性pH2时脱水 碱性条件下降解：弱碱性pH8，C环打开 螯合反应： 与高价金属离子 成盐：四环素与尿素形成复盐，用于精制 与长链季胺碱成盐，带同萃取反应 （三）、提取工艺 工艺要点：发酵液的预处理中酸化的作用、纯化剂的选择；结晶与尿素复盐 第三节 其他微生物药物 一、微生物产生的酶抑制剂 （一）β-内酰胺酶抑制剂 克拉维酸 舒巴坦 克拉维酸，英文名称Clavulanic?acid，简称CVA，又名棒酸 1975年，美国哈佛大学教授Woodward提出如把青霉素和头孢菌素的骨架进行组合的青酶烯一定会有很强的抗菌活力的假说 S -------o c-3 β-羟基乙叉取代基 C-6 上没有酰氨基 1976年从棒状链霉菌的代谢产物中分离得到了克拉维酸，本身抗菌活性很弱，但与羟氨苄青霉素组成的复合剂奥格门汀、与羧噻吩青霉素组成的复合剂timentin都具有很好的协同作用，并应用于临床。 克拉维酸提取纯化工艺 工艺要点：萃取与浓缩 沉淀：与碱性有机胺成盐而沉淀析出；10℃，搅拌加入5%（2－（二甲氨基） 乙基）醚的乙醇溶液 转型 （二）降血脂作用的酶抑制剂：洛伐他汀 ----胆固醇的生物合成途径 洛伐他汀lovastatin 1223A 2000年，降血脂药（降胆固醇药）成为全球第二