第九章吸光光度.pptVIP

第九章 吸光光度法 9-1 吸光光度法基本原理 9-2 光度计及其基本部件 9-3 显色反应及显色条件的选择 9-4 吸光度测量条件的选择 9-5 吸光光度法的应用 第一节 吸光光度法基本原理 1：最佳读数范围：A：0.15~1.0 T：10%~70% 2：浓度的相对误差最小时： A=0.434 T=36.8% 3. 改变吸光度A的方法 ①改变b，即比色皿厚度 ②改变C * * * * * 一、基本概念： 1.比色分析：P237L5 通过比较有色物质溶液颜色 的深浅来确定物质含量。 2.吸光光度法：基于物质对光的选择性吸收而 建立的分析方法。 3.可见光区：400nm ~750nm 单色光：具有同一波长的光。 复合光：由不同波长组成的光。 互补色光：若二种颜色的单色光按一定比例混 合成白光，此二种颜色光就是互 补色光。 黄 + 蓝 白光 互补色光 二、物质对光的选择性吸收： 例：CuSO4溶液为什么呈蓝色？ 吸收黄色光 1.结论：物质呈现颜色与吸收光颜色成互补。 2.吸收曲线：P242L4 描述物质对不同波长光的 吸收能力。 具体方法： C恒定，同一溶液 ?改变 ?1 ? A1 ?2 ? A2 …… 作A~?曲线，见图。 ?max=510nm ①结论：同一种物质，C改变，A改变，?max不变。 ②吸收曲线的作用：确定?max作测定波长。 500 600 700 400 ?(nm) A 0.100 0.200 0.300 0.500 0.400 Ⅰ Ⅱ Ⅲ 说明：图中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分别代表三种含量的1.10-邻二氮杂菲亚铁的吸收曲线 三、光的吸收基本定律： I入=I吸 + I反 + I透 简式： I入=I吸 + I透 （∵光度分析用相同材料、相同厚度的比色皿装参比液和待测液。） 1.基本概念: ①透光度T： ②吸光度A： 2.朗伯-比耳定律： (1) ③ ①b : 液层厚度，即比色皿厚度 cm ②C : 溶液浓度 g/L 吸收系数，与入射光波长、吸光物质性质、温度等有关。 L·g-1·cm-1 （2） C：mol/L b ：cm 摩尔吸收系数 ? ： L·mol-1·cm-1 ①吸光物质的特征常数。与入射光波长、吸光物质性质、温度等有关。 ②衡量显色反应的灵敏度。?值越大，灵敏度越高。 注： 四.朗伯-比耳定律的应用： 标准曲线法： A C Cx Ax 0 ①配标准系列C1，C2，··· ②固定b、?max,测相应的A1，A2， ··· ③作A~C标准曲线 ④测AX,在标准曲线上查对应的CX。 五、偏离比尔定律的原因： 1.物理原因：单色光 不纯。 2.化学因素：溶液本身 ①介质不均匀 ②溶液中的化学反应： 溶液中吸光物质离解、缔合等 C改变 偏离 第二节 光度计及其基本部件 1.光源： 钨丝灯 （要求：稳压电源才能 使光源光强度保持不变） （可见光区） 氢灯或氘灯（近紫外光区） 2.单色器： ? 将光源发出的连续光谱分解为单色光 棱镜 光栅 玻璃：可见光区 石英：紫外、可见光区 3.吸收池：比色皿 ①材料 可见光区：玻璃 紫外光区：石英 ②规格：0.5cm, 1cm, 2cm, 3cm ③比色皿使用注意事项: a.比色皿其两边是透明的，使光路通过，手 只能拿另两边磨砂面。 b.洗涤比色皿方法：  浸泡→水洗→蒸馏水洗。 洗涤液：盐酸∶乙醇=1∶2。 4.检测系统：接受从吸收池发出的透射光，将 光强度转换成电流来进行测量。P245 光源 单色器 吸收池 检测系统 结论： 第三节 显色反应及显色条件的选择 显色反应： M被测 + R显色剂 MR有色生成物 配位反应（主） 氧化还原反应 一、显色反应的选择： 1.灵敏度高。 （ ? 104 L·mol-1·cm-1） 2.选择性好。即干扰少或干扰易消除。 3.MR有色化合物组成恒定，化学性质稳定。 保证吸光度测定的重现性 4.显色剂在测定波长处无明显吸收。 二、显色条件的选择： 1.显色剂用量： 固定CM，其他条件 改变VR，测A 作A~VR 曲线 a≤VR≤b a’≤VR≤b’ VR严格控制 2.酸度： 显色剂的浓度、颜色。金属离子状态。 配