普通微生物学课后习题及答案第六章.doc

微生物的个体生长：指细胞物质有规律地、不可逆地增加，导致细胞体积扩大的生物学过程。 繁殖：引起生命个体数量增加的生物学过程。 微生物细胞数目的检测方法： 显微直接计数法：用计数板在光学显微镜下直接观察细胞并进行计数的方法。 活菌计数法：通过测定样品在培养基上形成的菌落数来间接确定其活菌的方法，计数依据是在稀释情况下一个菌落由一个活细胞繁殖形成，又称平板菌落计数法。 微生物生物量的测定方法： 1、湿重法 将微生物培养液离心，收集细胞沉淀物，然后称重。 2、干重法 将离心得到的细胞沉淀物置于100~105℃的烘箱中干燥过夜至水分去除，然后再称重。 3、比浊法 细菌培养物在其生长过程中，由于原生质含量的增加，会引起培养物混浊度的增加。在一定浓度范围内，悬液中细胞的数量与透光量成反比，与光吸收值成正比。因此利用分光光度计在450nm~650mn的某一波长可以测定培养物的光吸收值来确定细胞量。 4、生理指标法 与微生物生长量相平行的生理指标很多，可根据实验目的和条件适当选用。一般微生物细胞的含氮量比较稳定，故可用凯氏定氮法等测定其总氮量，再乘以系数6.25即为粗蛋白含量。蛋白质含量越高，说明菌体数和细胞物质量越高。 1、丝状微生物菌丝长度测定法 将真菌接种在琼脂平皿的中央，定时测定菌落的直径或面积。 2、培养料中菌体生长速率测定法 主要测定一定时间内固体培养料中菌丝体向前延伸的距离。 3、单个菌丝顶端生长速率测定法 可利用湿室培养法对丝状微生物进行培养，定时将湿室中的培养有微生物的载玻片置于显微镜下，借助目镜测微尺测定一定时间内单个菌丝的伸长长度。 微生物的同步生长与同步培养方法 同步培养法：使培养物中所有的微生物细胞都处于相同的生长阶段的培养方法。 同步生长：指这种培养物中所有微生物细胞都处于同一生长阶段，并都能同时分裂的生长方式。 获得微生物同步生长的方法主要有两类：环境条件诱导法：采用物理或化学因子使微生物细胞生长进行到某个阶段停止下来，使先到该阶段的微生物细胞不能进入下个阶段，待全部群体细胞都到达该生长阶段后，再除去该因子，使全部群体细胞同时进入下个生长阶段，达到诱导微生物细胞同步生长的目的。 机械筛选法：l利用处于同一生长阶段细胞的体积、大小的相同性，用过滤法、密度梯度离心法或膜洗脱法收集同步生长的细胞。 微生物个体生长： 细胞周期：从一个新产生的子细胞开始，经过生长和一次细胞分裂而形成新一代子细胞的过程称为细胞周期。 细菌细胞的生长：是指新生的细胞长大以及最后分裂为两个子细胞的过程，这样一个过程表现为二分裂的过程。原核生物的细胞周期可分为DNA复制前的准备期（I）,DNA复制期（R）、和细胞分裂期（D）共3个时期。 酵母细胞的生长：细胞体积的连续增加并在一定的间隔时间发生核和细胞的分裂，这样一个完整的生长过程就是酵母菌的细胞周期。酵母菌细胞分裂有芽殖和裂殖两种。以酿酒酵母为例，酵母菌的细胞周期可分为4个时期G1、S、G2、M。S和M分别是指DNA合成期和有丝分裂期，G1和G2期分别是指S和M期之间的间隙期。 丝状真菌菌丝的生长:丝状真菌的营养菌丝的生长主要以极性的顶端生长方式进行。菌丝顶端呈半椭圆形。原生质在菌丝细胞内部呈区域化的极性分布。 微生物的群体生长 单细胞微生物的典型生长曲线：定量描述液体培养基中微生物群体生长规律的曲线。如果以培养时间为横坐标，单细胞增长数目的对数为纵坐标，所绘制的曲线就是单细胞微生物生长曲线。 根据微生物的生长速率常数，即每小时分裂次数的不同，一般可把典型生长曲线分为延滞期、指数期、稳定期和衰亡期。 延迟期：又称停滞期、调整期或适应期。延迟期：指少量单细胞微生物接种到新鲜培养液中后，在开始培养的一段时间内，因代谢系统适应新环境的需要，细胞数目没有增加的一段时间。 特点：1、生长速率常数几乎等于零；2、菌体内含物明显增加，细胞个体体积增加。3、细胞内RNA尤其是rRNA含量增高，原生质呈嗜碱性；4、菌体的代谢机能非常活跃，产生特异性的酶、辅酶及某些中间代谢产物以适应环境的变化;5、对外界的不良条件反应敏感，抵抗力较弱。 影响延迟期长短的因素有很多，除菌种外的主要三方面：菌种的菌龄、接种量、培养基成分。 产生延迟期的原因：微生物接种到一个新环境中，细胞中一时还缺乏分解或催化有关底物的酶，或是缺乏充足的中间代谢物。为产生诱导酶或合成有关中间代谢物，就需要一段适应期。 指数期：在生长曲线中，紧接着延滞期之后，细菌细胞适应了新环境后，以最快速度生长，细胞数目以几何级数增加，这一时期称为对数生长期，又称指数生长期。 代时：在对数期，根据细胞增加的总数可以计算出细胞分裂一次所需要的时间。 生长速率：单位时间内繁殖的代数。 倍增时间：原生质增加一倍所需的时间。 对数期的特点：1、生长速率常数R最大，因而细胞每分