生物化学（王金福）BB[01].pptVIP

* * Hb: * 5、凝胶过滤法测定相对分子质量 通过凝胶过滤可以把蛋白质混合物按分子的大小分离开来。 蛋白质分子通过凝胶柱的速度并不直接取决于分子的质量，而是它的斯托克半径。 某种蛋白质如果与一理想的非水化球体具有相同的过柱速度，则认为这种蛋白质具有与此球体相同的半径，称蛋白质分子的斯托克半径。 测定方法： 首先侧得几种相对分子质量已知的蛋白质标准物的过柱速度，并以其相对分子质量的对数与过柱速度作标准直线图，然后测出蛋白质样品的过柱速度，即可从标准直线图中确定样品的相对分子质量。 5、SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定相对分子质量 蛋白质颗粒在聚丙烯酰胺凝胶中电泳时，其迁移率决定于其所带的净电荷、分子大小和形状等。 如果在聚丙烯酰胺凝胶中加入阴离子去污剂十二烷基硫酸钠（SDS）和巯基乙醇，则蛋白质迁移率主要取决于其相对分子质量，而与原来所带的电荷和分子形状无关。 SDS是一种有效变性剂，能破坏蛋白质分子中的氢键和疏水作用，而巯基乙醇能破坏二硫键，因此在二者作用下，单体蛋白质或亚基处于展开状态，SDS与蛋白质分子结合成复合体。 复合体的形成造成了2种结果： 1、不同蛋白质被阴离子SDS覆盖而具有相同密度的负电荷； 2、不同蛋白质单