转 细胞污染 图.docVIP

细菌培养液是被洋葱佰克霍尔德菌污染了 洋葱佰克霍尔德菌（Burkholderiacepacia）原属假单胞菌属，是植物病原菌，因引起洋葱患病而得名，是医院感染病原菌之一。 洋葱伯克霍尔德菌是一种广泛存在于土壤及水中，与医院感染密切相关的革兰阴性杆菌，尤其为免疫缺陷及肺囊性纤维化患者易感染细菌之一。它可以在无糖的培养基中生长。在医院环境中常可污染自来水、体温表、喷雾器、静脉导管、导尿管、静脉输液管等，造成院内传播，导致多种医院感染，如败血症、心内膜炎、肺炎、伤口感染、深部脓肿和眼结膜炎等，尤其采用导管植入进行治疗者，更容易引起感染。洋葱伯克霍尔德菌对多种抗菌药具有天然的耐药性。耐药现象严重，治疗可选择复方磺胺甲繟唑、哌拉西林,三唑巴坦、哌拉西林和头孢他啶等抗菌药物。 白色念珠菌污染：（倒置） 白色链球菌是常见的细胞污染 革兰氏染色阳性 通过革兰氏染液染色的链球菌 中间长梭型的是正在分裂的念珠菌 真菌污染 真菌污染 支原体污染电镜照片(X30k),煎蛋状和其他形状 支原体污染电镜照片（X30k） 支原体污染电镜照片（X12k） 上面这个很明显是霉菌，确切的说应该属于丝霉，因为你可以看到明显的菌丝，有些种类是无横隔的，有的是具横隔的，培养基呈淡紫色，或不变色，但会变得粘稠。 污染来源：一般是来自实验服，并且具有季节性，像现在这种长蘑菇的季节很容易污染这种菌类。 这个是细菌污染，你在倒置显微镜下无法看到细菌的结构（需油镜），污染晚期培养基呈黄色。  这个可能是螨虫。。。。。。这个是原代培养皮肤成纤维细胞时污染的，形态呈杆状，能自主直线游动，速度相当快。。污染源：小鼠毛发中。。。 这个可能是酵母污染，镜下能隐约看到出芽生殖，不过不知道酵母会不会呈团聚集在一起，因为照片中那团黄色的东西也是此污染物，肉眼观察使可看到明显的白色或淡黄色颗粒状的漂浮物，同样这个污染源也是小鼠的皮肤。。。。  细胞培养过程中如果操作不当或者条件控制不合适见容易受到化学或者生物因素的污染，常见的污染源有：　 1、细菌污染　　细菌污染是实验室细胞培养中常见的污染，即使在细胞培养液中加入了抗菌素，也可能因为操作不慎而引起污染。最常见的有革兰氏阳性菌，如枯草杆菌以及大肠杆菌、假单胞菌等革兰氏阴性菌，其中又以白色葡萄球菌较常见。　　培养细胞受细菌污染后，会出现培养液变混浊，pH改变。污染后细胞发生病理改变，胞内颗粒增多、增粗，最后变圆脱落死亡。　　小鼠胃癌细胞的球菌感染图片：　　2、真菌污染　　真菌污染是细胞培养过程中最常见的一种，最常见的真菌有烟曲霉、黑曲菌、孔子霉、毛霉菌、白色念珠菌和酵母菌。　　培养细胞受真菌污染后，可见培养液中漂浮着白色或浅黄色的小点，有的散在生长，培养液一般不发生混浊；倒置显微镜下可见丝状、管状或树枝状的菌丝纵横交错在细胞之间或培养基中，有的呈链状排列。　　真菌污染后，细胞生长变慢，但最后由于营养耗尽及毒性作用而使细胞脱落死亡。　　3、支原体污染　　支原体是介于细菌与病毒之间能独立生活的最小微生物，最小直径0.2μm，一般过滤除菌无法去除它，光镜下难以看清它的形态结构。开始不易发现，能在偏碱条件下生存，对青霉素有抗药性。多吸附于细胞表面或散在于细胞之间。　　培养细胞受支原体污染后，部分敏感细胞可见细胞生长增殖变慢，部分细胞变圆，从瓶壁脱落。但多数细胞污染后无明显变化，或略有变化，若不及时处理，还会产生交叉污染。　　4、病毒污染　　组织细胞培养过程中，如果没有除去潜在的病毒，就会产生病毒污染。目前，从原代猴肾细胞的培养中已发现不少于20种血清性病毒。　　尽管病毒污染的细胞不影响原代培养，但生产疫苗是不安全的。因此，潜在病毒是细胞大量生产和疫苗、干扰素等生物制品制作中的难题。　　5、非同种细胞污染　　由于细胞培养操作时各细胞株所需的器材和溶液没有严格分开，往往会使一种细胞被另一种细胞污染。目前，世界上已有几十种细胞都被HeLa细胞所污染，致使许多实验宣告无效。 在发现培养的细胞出现生长异常时需要对细胞的污染情况进行鉴别，以利于采取补救措施。常见的污染鉴别方法如下：　　1、细菌、真菌污染的检测　　（1）肉眼观察　　细菌、真菌污染常在传代、换液、加样等开放性操作之后发生，而且增生迅速，若有污染，在48小时内可明显观察到，例如培养液变混浊，或略加振荡有很多漂浮物漂起。　　（3）接种观察　　采用普通肉汤接种或用未加双抗药物的培养液接种，也可发现是否有污染。　　（2）镜下观察　　在倒置显微镜的高倍镜下可见培养液中有大量圆球状颗粒漂浮，即为细菌污染。　　若细胞之间有丝状、管状、树枝状或卵形的物质常为真菌污染。　　2、支原体污染的检测　　（1