12级创新班-微生物遗传学操作程序.docVIP

微生物遗传学综合大实验操作程序 2014. 05.7 (12级创新班 ) 地点：十教312 Stage Date Day No. Time Operation Preparation 平皿 枪头 0. 实验准备 05 / 7 周三 1 8:00-11：00 准备培养基，器材 1. 微生物诱变 05 /7 Wed 2 17:00 接种4mLCM; 37℃, 100rpm, 过夜 黑纸袋 05/ 8 Thu 3 13:00 19:15 20:00 加4mLCM 取4mL培养物→离心管，3500rpm,10min,去上清 加4mL 生理盐水，UV处理，加4mL CM2X，罩黑纸袋，37℃, 12h 无菌平皿一块 1 / 组 蓝( 1 05 /9 Fri 4 8:00 9:00 09:00 20:40 取4mL培养物，3500rpm,10min，倾上清液，打匀沉淀，加入4mL生理盐水，(2次； 加4mL 生理盐水，取0.05mL菌液→2.5mL MM (-N), 37℃, 100rpm, 12h 倒平板 注意：平板表面一定无水滴 加入2.5mL MM (2N), 加penicillin 1000IU/mL MM、CM各2块 / 组 （2次涂布用） 2 / 组 蓝( 1 黄( 1 黄( 1 2. 营养缺陷型浓缩 05 / 10 Sat 5 15:30 取0.1mL 涂平板，MM、CM各1块 （18h） MM、CM各1块 / 组 （挑菌落时用） 1/ 组 黄( 2 3. 营养缺陷型筛选 05/ 11 Sun 6 19:30 挑50个菌落 方格纸 ( 50 MM平板 ( 10（复证） 1/ 组 05 / 12 Mon 7 19:30 划线复证 4. 营养缺陷型鉴定 05 / 13 Tue 8 20:30 20:30 接种4mLCM, 37℃, 100rpm, 过夜； 倒平板 方格纸(40 MM 平板 ( 20 （加氨基酸、维生素） 2 / 组 黄枪头盒1 05 / 14 Wed 9 14:30 4000rpm,15min, 离心洗涤, (2次；分类生长法； 05 / 16 Fri 10 08:00 观察结果, 洗刷器皿；实验报告。 30人: 器材(组): 平皿10, 试管14, 蓝枪头( 2, 黄枪头( 5, 离心管4 MM:1500mL, CM:1200mL; 4mLCM ( 30, 4mLCM(2X) ( 15；2.5mL MM (-N) ( 15, 2.5mL MM (2N) ( 15 10 /组 蓝(2 黄(4