免疫分析方法的现状及进展.pdfVIP

主圄匿堂薹鱼塑查塑!堡S旦鱼亟塑!』型堕塑型型野翌型!坚：幽 【医学实验室设备】 免疫分析方法的现状及进展 黄昊 (解放军总医院器械处医工中心，北京100000) 1免疫分析的基本原理 5免疫荧光分析 免疫分析是机体对外界或体内的异常物质产生的一种防 免疫荧光分析法是以荧光物质作为标记物，与己知的抗 御反应，可分为细胞免疫和体液免疫，其中体液免疫反应由抗 体(或抗原)结合，根据荧光的强度来测定抗原或抗体的含量。 原和抗体组成。 根据荧光物质的不同性质，可以采用不同荧光分析方法。 抗原抗体反应是指由抗原物质刺激机体产生相应的抗体 目前用于医学检验的免疫荧光测定仪器可分为三类： 后，两者在体内或体外发生的特异性结合反应。抗原与抗体 时间分辨荧光免疫测定，利用时间分辨荧光测量方法可 在体外结合时，可因抗原的物理性状不同或参与反应的成份 以排除样品中非特异荧光的干扰，最大限度的提高测定方法 不同而出现各种反应，例如凝剂、沉淀、补体结合及中和反应 的特异性和灵敏度。 等，这四种类型的反应被广泛的应用于研究机体的体液免疫 荧光偏振免疫分析，是利用荧光物质经单一波长的偏振 应答，抗原与抗体的特性研究以及疾病的辅助诊断等。 光照射后，能吸收光能并发射出相应的偏振荧光，其光强大小 2免疫浊度测定 与荧光分子的大小相关，依此而建立起来的一种定量免疫分 免疫浊度分析是可溶性抗原抗体在液相中特异结合，产 析技术。 生一定大小的复合物颗粒，使得液体的浊度发生改变。利用 酶联免疫荧光分析，是用荧光物质作为底物进行酶联免 比浊法(透射比浊和散射比浊)即可确定抗原或抗体的量。 疫分析的方法，只是最后用荧光计对其荧光强度进行测量，从 然而，早期的浊度法操作繁琐，敏感性低和费时而趋于淘 而进行定量分析。 汰，直到速率比浊法的提出。速率比浊法利用单位时间内形 6化学发光免疫测定 成复合物的速率与反应液中抗原的量呈线性关系来进行测 免疫测定对测量速度、试剂消耗、操作的简单与否以及标 定，使得分析速度大大提高，适应了近代测定的自动，快速和 准曲线的长期稳定性等特性的要求很高，对灵敏度、特异性和 简便的要求。至此，各种速率比浊测定血浆蛋白的仪器相继 精确性的要求也越来越高。建立于20世纪70年代的化学发 问世，并逐渐的实现了测定全过程的机械化、自动化。 光免疫测定(血工A)以化学发光物质或催化发光反应的酶作为 免疫浊度法在检测高浓度的高分子量蛋白质时效果很 免疫标记物进行测定，它结合了化学发光反应和免疫反应，既 好，但当测定激素、药物、或血清中低浓度、低分子量蛋白质等 具有免疫反应的特异性，又兼有发光反应的高灵敏性，较好的 中低浓度复合物时，这些抗原抗体复合物不能显著改变平均 满足了上述要求。 分子量从而产生区别于背景的高强度信号。而标记免疫分析 此外，Ⅱ工A作为一种非放射标记的测定技术，克服了放射 方法的出现，则大大提高了免疫分析的敏感度。标记分析是 免疫分析法的诸多不便；与酶联免疫分析法相比，因酶免分析使 将标记物结合在抗原或抗体上，通过测定反应产物中标记物 用显色底物，其吸光度遵循朗伯比尔定律，标准曲线直线范围同 的含量来确定抗原或抗体的含量。标记分析根据所采用的标 较窄，而Ⅱ王A则无此限制；另外，荧光免疫分析法受自然荧光的 记物的不同，可分为放射免疫分析，酶联免疫分析和光免疫分 干扰，容易影响检测敏感度，而在免疫分析材料或生物样品中几 析等几种。