噬菌体的裂解途径和溶原途径.pptVIP

第四节 Cro蛋白的功能 小分子二聚体（每个亚基为9KDa） 具有两种效能: (1) 阻止启动子PRM转录； (2)也可抑制从PL和PR起始的早期基因的表达。 * 第五节 溶原化和裂解周期平衡 进入溶原化 1.营养耗尽 未发现cAMP-CAP对λ基因表达的调控 对宿主: 抗溶原基因hfl 水解CⅡ蛋白 cAMP-CAP himA 整合酶亚基 2.感染复数(multiplicuty of infection,MOI)过高 CⅡ：a.启动PRE b.启动P i c.启动P AQ CⅡ单体无活性，形成寡聚体才有活性 * 第十七章噬菌体的裂解途径和溶原化途径的选择和调控 第一节 λ噬菌体的基因组及早、晚期转录 一． 裂解的级联调节 λ噬菌体长48502nt 共61个基因，其中32个较为重要 溶原化周期 (LYSOGENIC ) 裂解周期(LYTIC) * * * ?噬菌体的早，晚期转录 * * * * * 二．反终止作用 * * * 第二节 溶原化途径的维持 一、CI蛋白功能 清晰的噬菌斑（Clear plaquea） RM：repressor maintenance 二．CI蛋白的结构 分子量为27KDa，具有两个功能区 (1) N端功能区，1~92aa，操纵基因结合区; (2) C端功能区,132～236aa，负责形成二聚体。 * CⅠ蛋白 的结构 * UV可激活Rec蛋白，活化的Rec蛋白可剪切CⅠ蛋白 * CⅠ蛋白的N端含有5个?螺旋,第2和第3个?螺旋形成HTH(螺旋转角螺旋) * CⅠ蛋白二聚体N端的HTH和DNA结合，螺旋3位于DNA的大沟 * CⅠ蛋白与DNA结合的信号 * 螺旋2上具有正调控区，此区靠近RNA聚合酶及DNA上的磷酸化位点 * CⅠ蛋白的合成是通过CⅡ蛋白激活和RNA聚合酶在PRE上的转录 * * * * * * * * 三.阻遏物与DNA的结合及调机制 螺旋转角螺旋(helix-turn-helix,HTH) 识别螺旋（recognition helix） 四.反义RNA调控 1.PAQ 抑制 Q 基因 表达 2.P RE 抑制 cro 基因 表达 五.反向调节 * * 游离λ噬菌体 P L启动子转录的RNA是否会产生 sib 位点？ 游离λ噬菌体 P I启动子转录的RNA是否会产生 sib 位点？ 原噬菌体λ的 P L启动子转录的RNA是否会产生 sib 位点？ * 表1λ主要的位点及基因的功能 位点或基因 产物及功能 PL,OL, PR,OR 左右向转录的启动子和操纵子 tR (1,2,3,4,5) 右向转录的终止子 tL(1,2) 右向转录的终止子 PRE CⅠ蛋白建立启动子，受CⅡ蛋白调控 PI int′基因启动子，受CⅡ蛋白调控 PaQ Q蛋白反义RNA启动子，受CⅡ蛋白调控 PRM CⅠ蛋白基因维持启动子，受CⅠ浓度调控 PR′ 晚期转录的启动子 nutL, nutR N蛋白左右两个反终止结合位点 qut Q蛋白反终止结合位点 cro PL和PR的阻遏蛋白，并可阻遏PE，抑制 CI 表达 cI PL 和PR 的主要的阻遏物，并可自主调控PE cⅡ 可以启动PE 、PI 和PaQ，使λ进入溶原化途径 cⅢ 和CⅡ组成复合物，启动PE产生CⅠ及Cro的反义RNA N tR1, tR2及tL1的反终止蛋白 Q tR4的反终止蛋白. O, P DNA复制所需的蛋白 S, R, 裂解宿主所需的裂解酶 Int 整合酶，使λ整合到宿主的染色体中 Xis 切除酶，帮助λ在att位点和宿主连接 bet, exo 重组蛋白，帮助λ和宿主进行重组 W, B, Nu3, C, D, E, FⅠ, FⅡ，Z 头部蛋白基因 U, V, G, T, H, M, L, K, I, J 尾部蛋白基因 Cos(cohesive) 12bp的回文序列，由线状连接成环状的连接点， A蛋白切割位点 A 末端酶，识别cos位点，包装时将环连体切成单 个的基因组