实验室安全与护-2011.03.30.ppt

医学生化与分子生物学 实验室安全与防护 ;实验室安全涉及面广;化学试剂多： 氯仿、甲醇、乙醇、酸碱等 生物样品多：细胞、细菌、蛋白、抗体、核酸、临床标本等 仪器多：高压蒸气灭菌锅、电泳仪、PCR仪、离心机、紫外透射仪等 特殊样品、特殊动物：标记探针、转基因动物、各种病理动物模型;化学试剂、有毒药品导致的伤害 生物样品(细菌等)及废液所致的感染、污染 辐射、紫外线损伤 意外事故 放射性同位素污染;实验室安全事故案例;事故原因; 保障个人及他人的人身安全 保障实验室的安全：防火、防水等 避免实验室内环境污染：化学、生物污染 避免实验室外环境污染：河流、土壤 ;Outline ; 熟悉实验室周围的安全出口 熟悉灭火器、灭火砂等的存放位置及使用 实验室应备有急救药箱或简单的急救物品，如创可贴、碘酒等 实验室内禁止吸烟！; 实验时：穿隔离衣，戴消毒手套，不穿凉鞋、不露趾鞋 实验后：整理台面、处理废弃物品(不得随意丢弃);;化学试剂危险性标志;生物实验室常用化学试剂;氯 仿;使用与防护： 不可倒入下水道，以免集聚引起火灾 远离火源、热源 保持室内良好通风 实验室里不宜大量贮存;使用与防护： 配制时，大量放热，使用耐热容器 浓酸贴壁分次加入重铬酸钾水溶液 使用时，戴长臂耐酸乳胶手套;使用与防护： 废液不能直接倒入水槽！ 方法：先大量用水稀释，然后倒入厕所等下水道或水槽，再用大量自来水冲洗下水道或水槽;特点： 核酸嵌入剂，用于核酸电泳的染色 强致突变剂，工作浓度0.5μg/ml;方法多，各有利弊 漂白剂处理法（有争论，但操作方便） －加等量的漂白剂(bleach)，放置2－3天 －用NaOH溶液调节pH至4－9后，倒入下水道中，大量水冲洗 活性炭处理法： －每100ml溶液加入100mg粉末活性炭 －室温搅拌1h后过滤，弃滤液、滤纸及活性炭;特点： 易发生脱氨反应，避光、低温、短期保存 强神经毒性，可透皮吸收;特点： 琼脂糖凝胶、PAGE胶不易降解;常用生物样品 －正确使用与安全防护;医学分子生物学实验室常用生物材料;《医疗废物管理条例》2003年6月16日 按类别、使用专用包装袋收集医疗废物 《中华人民共和国传染病防治法》 （04年8月28日修订版）;GB19489—2004《实验室生物安全通用要求》 －2004年5月国家质监总局和标准化管理委员会 颁布，04年10月1日正式实施 －我国第一部实验室生物安全国家标准 －适用于医学实验室、各类生物实验室;Biohazard warning sign;生物材料危害警告标识;一级防护: --安全设备、个体防护装置 (生物安全柜；防护衣、帽等) 二级防护： --实验室的特殊设计要求 规范操作： --严格管理制度 --标准化的操作程序;生物样品的正确使用;生物样品的正确使用;生物样品的正确使用;生物样品的正确使用;需置于EP管或有盖的容器内，防止样品流出 应有明显的标记（如：感染性材料…) 样本应低温运输（4℃或以下） 如有破损、泄漏，需按规定处理;使用实验室微波炉、冰箱烹调或储存食物 不用适当的防护设备，如隔离衣、手套等 不按实验规程操作，或意外受伤;实 例;实 例;实 例;储存：专门放置生物废弃物的容器 灭活：所有生物废弃物必须灭活后丢弃，如高压灭活等 运输：出实验室经灭活的弃物必须使用专用密闭防漏的容器运输;高压蒸气灭菌（autoclave） -方法：121℃，15psi，15－40 min -适合所有污染物的灭菌 紫外线照射灭菌：空气、物体表面杀菌 -无菌室或污染区域照射，至少30 min; 70～75% Ethanol －皮肤、实验台面的污染 次氯酸钠(漂白剂，1-20%稀释液) －台面污染，玻璃器皿等灭菌;实验室入口：生物危险标志、生物安全级别、负责人姓名和电话、进入实验室的特殊要求等 禁止非工作人员进入实验室 使用专用的防护性外衣 －不得穿防护衣到非实验室区域 －防护衣在指定区域洗涤，不得带回家洗涤;常用仪器与玻璃器皿 －正确使用与安全防护;低速、高速、超速离心机 紫外透射反射分析仪、分光光度计 电泳相关设备、各种PCR仪、酶标仪 凝胶成像仪、流式细胞仪、化学发光仪 高压蒸汽灭菌器（锅） 电热干燥箱（烘箱）、微波炉等;仪器使用安全;离心机： 离心机需放置于平稳、牢固的地方 远离酸碱等腐蚀性试剂 样品离心前必须进行平衡 离心样品对称放置 离心前务必检查转子是否挂好 低温离心机使用后， 切勿关盖长期放置！;常用仪器的正确使用;蒸气高压灭菌锅： 使用前检查是否有蒸馏水（经常更换,预