Borna病病毒与淋巴瘤关系的初步研究论文.docVIP

　　Borna病病毒与淋巴瘤关系的初步研究论文 杨泽松，陈建斌，牟君，谢鹏，赵立波，张小东，李勇 【摘要】 ［目的］ 探讨Borna病病毒（BDV）感染与人类淋巴瘤的关系。［方法］ 采用荧光定量套式逆转录酶聚合酶链式反应(FQ-nRT-PCR)，检测了经病理学诊断的非霍奇金淋巴瘤（NHL）14例、霍奇金淋巴瘤（HD）6例及健康人20例的外周血单个核细胞（PBMC）中BDV p24基因片段。［结果］ 20例淋巴瘤患者与20例健康对照者的BDV p24基因片段检测均为阴性。［结论］淋巴瘤与BDV感染无明显相关性。 【关键词】 淋巴瘤 Relationship betphoma and Borna Disease Virus Abstract: ［Purpose］ To explore the relationship betphoma and infection of Borna disease virus (BDV). ［Methods］ The p24 fragment of BDV RNA in peripheral blood mononuclear cells (PBMC) in 14 cases phoma（NHL）, 6 cases phoma （HD） and 20 volunteers ined by fluorescence quantitative nested reverse transcriptase polymerase chain reaction (FQ-nRT-PCR). ［Result］ The BDV P24 fragment phoma and 20 volunteers. ［Conclusion］ The infection of BDV may be not correlated to lymphoma. Key phoma; Borna disease virus（BDV）; polymerase chain reaction (PCR) Borna病病毒（Borna disease virus.freelphterin（HMGB1）的A-box结构域结合，这一结构域与肿瘤抑制因子p53有交互作用，并证明BDV磷蛋白P可能是与HMGB1结合而抑制p53的一种特殊抑制因子，这可能是BDV感染诱发肿瘤的机制之一2。我们采用荧光定量套式RT-PCR（fluorescence quantitative nested RT-PCR，FQ-nRT-PCR）检测临床经病理诊断的淋巴瘤患者外周血单个核细胞（PBMC）中BDV p24基因片段。现将初步结果报道如下。 1 材料与方法 1．1 研究对象 20例病例均系我院血液内科2004年1月至2005年6月经病理学确诊的淋巴瘤初诊住院患者，其中非霍奇金淋巴瘤（NHL）14例(男性9例，女性5例，平均年龄30.3±12.4岁，B细胞淋巴瘤4例，T细胞淋巴瘤10例)，霍奇金淋巴瘤（HD）6例(男性4例，女性2例, 平均年龄26.1±7.5岁，淋巴细胞为主型2例，淋巴细胞衰减型3例，混合细胞型2例)。以上患者临床分期均为ⅣB期。20例患者均出现不同程度的发热、盗汗和体重减轻，均无肿瘤及肿瘤家族史。来自农村的患者11例，来自城市者9例。7例患者有长期（3～15年，平均9.5±3.3年）动物密切接触史，但均否认与患病动物或病死动物接触史，其中养猫者2例，养狗者3例，养牛者1例，养羊者1例；有较长期野外工作史（从事地质勘探工作3～5年）者2例；有较长接触苯等装修材料者2例；其余患者均无密切接触动物史和长期野外工作史及接触苯等装修材料史。健康对照男女各10例，平均年龄29.3±9.2岁。 1．2 主要试剂及仪器 引物序列由上海博亚生物技术有限公司合成；荧光探针的序列由中山大学达安基因诊断中心合成。Roter-Gene3000荧光定量PCR仪（澳大利亚Corbett Research公司），四甲基罗达明（tramethylrhodamine，TAMRA），PE394探针合成仪（美国Perkin Elmer公司），淋巴细胞分离Ficoll-conray液（上海恒信化学试剂有限公司），Tripure RNA提取试剂盒（Boehring-Mannheim公司）等。 1．3 实验方法 1．3．1 引物和探针设计、合成 从美国国立卫生研究院基因列数据库（GeneBank）中调出BDV的第二开放阅读框（ORFⅡ）区序列，设计扩增BDVp24基因片段的引物序列为：①外引物：P1：5′-TCAGACCCAGACCAGCGAA-3′(19bp)；P2：5′-ATCTGGGGATAAATGCGCG-3′(19bp)。②内引物：P1：5′-CCCTCCAAGTGG