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不同提取方法对虎杖中蒽醌类成分及其抗氧化活性影响的研究论文.doc
不同提取方法对虎杖中蒽醌类成分及其抗氧化活性影响的研究论文
.freelethods on the content of anthroquinone pound and its antioxidative activity in Polygonum cuspidatum Sieb. et Zucc..MethodsAnthroquinone pound ethod, Soxhlet extraction method ultrasound ethod and microined by spectrophotometry. The correlation betong the four extraction method stated(P<0.05),Soxhlet extraction method ethod ination of total anthroquinone, the result ethod(1.16%) ultrasound ethod(1.15%)microethod extraction. The reflux method icroethod and ultrasound ethod. There ination of its antioxidant activity(P<0.05). There cuspidatum Sieb. et Zucc. ethods, there ethod; Polygonum cuspidatum Sieb. et Zucc.; Athroquinone pound; Spectrophotometry; Antioxidative activity
虎杖系蓼科蓼属植物虎杖Polygonum cuspidatum Sieb.et Zucc.的根茎和根,具有抗菌、抗病毒等广泛的治疗作用[1]。其主要有效成分为蒽醌类、二苯乙烯类、黄酮类等。随着近年来对其药理作用的深入研究,虎杖的抗氧化作用也日益为人们所重视[2,3]。蒽醌类成分作为虎杖中主要有效成分,在治疗疾病过程中起着较为重要的作用,本实验主要研究了不同提取方法对虎杖中蒽醌类成分及其抗氧化作用的影响,并分析蒽醌类成分和抗氧化活性之间的关系。
1 仪器与材料
1.1 仪器
JY92-Ⅱ超声波细胞破碎仪,宁波新芝科器所;微波炉,广东美的微波炉制造有限公司;UV-2800紫外分光光度计,尤尼柯(上海)仪器厂;酸度计,意大利哈钠;微量移液器,eppendorf;Sartorius 电子天平(型号1702,称量范围200g,感量0.1mg),德国Sartorius;FZ102微型植物试样粉碎机,北京市永光明医疗仪器厂;回流提取装置;索氏提取装置。
1.2 材料
大黄素对照品(中国药品生物制品检定所,批号110756-200110,供含量测定用,经归一化法标定98.0%);二苯代苦味酰基自由基(1,1-pheny-2-picrylhydrazyl,DPPH) Sigma;TPTZ(2,4,6-tripyridyl-s-trizine)Sigma;虎杖药材(购自河南仟僖堂医药公司,经河南中医学院曹继华教授鉴定为正品);其余试剂均为国产分析纯。
2 方法
2.1 对照品溶液的制备精密称取大黄素对照品(105℃干燥至恒重)4.1 mg,置50 ml量瓶中,加甲醇溶解,定容至刻度。精密吸取上述溶液1 ml,置10 ml量瓶中,加0.5%醋酸镁-甲醇溶液至刻度,作为对照品溶液。
2.2 样品的前处理将虎杖经过干燥,采用微型植物试样粉碎机进行粉碎,过60目筛,粉末经恒温(60℃)干燥24 h后,放干燥器中,备用。
2.3 供试品溶液的制备
2.3.1 回流提取液的制备精密称取2.2项下样品约0.5 g,置50 ml的圆底烧瓶中,加70%的乙醇回流提取3次,提取时间分别为1.5,1,1 h,乙醇用量分别为20,15,15 ml,合并3次回流提取液,定容至100 ml的容量瓶中,备用。
2.3.2 索氏提取液的制备精密称取2.2项下样品约0.5 g,采用70%乙醇进行索氏提取,提取至无颜色为止(约6 h),提取液定容至100 ml的容量瓶中,备用。
2.3.3 超声提取液的制备精密称取2.2项下样品约0.5 g,置50 ml的三角瓶中,70%的乙醇超声提取3次,3 min/次(辐射时间为10 s/次,间隙10 s,工作18次),乙醇用量分别为20,15 ,15 ml。合并3次的超声提取液,定容置100 ml的容量瓶中,备用。
2.3.4 微波提取液的制备精密称取2.2项下样品约0.5 g,置50 ml的三角瓶中,70%的乙醇微波提取,提取3次,1 min/次,(工作时间为10 s/次,间隙60 s,工作6次),乙醇
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