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　　中草药叶下花总黄酮提取方法论文 杨发忠，杨斌，杨德强，陈厚琴，代红娟，张丽，李东海 【摘要】 目的对叶下花总黄酮的种类与提取方法进行初步研究。方法采用定性检测、光谱分析、单因素测定、正交实验等，研究黄酮种类.freelin，固液比1∶80)，在此提取条件下，提取量高达5.233%。 【关键词】 叶下花 总黄酮 提取方法 正交实验 Abstract：ObjectiveTo optimize the extraction conditions for the total flavonoids from Ainsliaea pertyoides Franch and to study the categories of the total flavonoids. MethodsThe methods of the chemical qualitative detection, the spectral analysis, single factor determination, orthogonal test e fraction of ethanol, the temperature, the ratio of solid to liquid, the extracting time, on the rate of the total flavonoids, e time. Results1)The total flavonoids consisted of flavones, flavonols, flavanones,.freele fraction of ethanol temperature extracting time ratio of solid to liquid. ConclusionThe optimum extraction conditions are A1B2C3D3. The highest extraction rate of the total flavonoids reached 5.233% under the optimal conditions. Key ethods; Orthogonal test 叶下花Ainsliaea pertyoides Franch. var. albo-tomentosa Beauverd也称白背兔耳风、白背叶下花、追风箭等，菊科(positae )帚菊木族(Mutisieae Cass)兔耳风属(Ainsliaea DC)草本植物［1］，是《本草纲目》等多部药典收录的天然药用植物［1］。叶下花作为骨科良药分布广泛、资源丰富、临床应用和民间用药历史十分悠久，并能用于治疗强直性脊柱炎，填补了中药治疗在此领域的空白［2］，意义重大。本研究小组发现［3］，叶下花中黄酮类化合物具有明显的抗氧化活性和羟基自由基清除能力，但不清楚叶下花作为骨科良药的活性成分是否与此有关。已有很多文献指出，高等植物中类黄酮有多种药理作用，是一类十分重要的天然有机化合物，其中很多接骨效果很好的药用植物，其活性成分就是黄酮类化合物［4～8］，所以本工作首先对叶下花总黄酮提取方法进行研究，以期为叶下花黄酮药理活性及叶下花中药现代化的研究奠定基础。 1 材料与仪器 1.1 中药材叶下花干燥全草于2006-10采自云南省楚雄市树苴镇，洗净、风干、粉碎、过40目筛，备用。 1.2 仪器与试剂 Unic 7200型分光光度计［尤尼柯(上海)仪器有限公司］；Bs210s电子天平(北京赛多利斯天平有限公司)；Hg粉、无水乙醇等均为分析纯，实验用水为去离子水。 2 方法 2.1 黄酮类化合物的定性检测［9］ 2.1.1 盐酸-镁粉反应取提取液1 ml加入少许镁粉，振摇后加浓盐酸4～5滴，加热3 min。 2.1.2 三氯化铝试验取提取液滴于滤纸上，喷1% AlCl3乙醇溶液。 2.1.3 与碱反应试验取提取液1 ml，加入10% Na2CO3 5滴。 2.1.4 三氯化铁试验取提取液，滴加1%的三氯化铁溶液。 2.1.5 铅盐沉淀试验取提取液2 ml，滴加乙酸铅试剂。 2.1.6 Molish反应取提取液加入α-萘酚乙醇溶液，缓慢加入硫酸。 2.2 检测波长的选择和标准工作曲线的绘制 采用NaNO2-Al (NO3)3-NaOH法测定总黄酮［10～12］，并稍作改动。 精密称取芦丁标准品50 mg，置于50 ml容量瓶中，加60%乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得1 000 μg/ml芦丁标准溶液。 同时用30%的乙醇-水(V/V)对叶下花干燥粉末进行提取，并用石油醚反复多次萃取至石油醚层无色，获得下层的叶下花总黄酮提取物，定容至合适的体积。 将芦丁标准溶液