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中药丹参有效成分的提取分离方法研究进展论文.doc
中药丹参有效成分的提取分离方法研究进展论文
张中堂,张群林,张云静1,丁秀年
【摘要】 综述了丹参有效成分的各种提取分离技术,其中包括超临界流体萃取技术、微波辅助萃取法、加压液体萃取法、高速逆流色谱法和真空液相层析法等,并分别对其优缺点进行分析,为丹参药理学活性物质基础的研究提供参考。
【关键词】 丹参; 有效成分; 提取分离
丹参为唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥根及根茎,始载于《神农本草经》.freelicroatography,HSCCC)和真空液相层析法(vacuum liquid chromatography,VLC)等。通过查阅国内外相关文献,本文对丹参有效成分的提取分离方法进行综述。
1 丹参有效成分的演变
20世纪30~60年代,丹参有效成分的研究重点为脂溶性成分。1979年姚俊严等从丹参中分离出原儿茶醛,从而把研究重点转移到水溶性成分。20世纪80年代后期至90年代,人们在分离丹参水溶性酚酸成分时,发现丹参的主要活性成分为水溶性酚酸。
丹参的化学成分复杂,其中包括①二萜醌类,如丹参酮I,IIA,IIB、异丹参酮I,II、隐丹参酮、异隐丹参酮、二氢丹参酮I、二氢异丹参酮I等; ②酚酸类,如丹酚酸A—K、原儿茶醛、丹参素、熊果酸、异阿魏酸等; ③其它成分,如黄芩苷、β-谷甾醇、胡萝卜苷、氨基酸、无机元素等。丹参有效成分通常被归为两大类:脂溶性成分和水溶性成分。目前,丹参脂溶性成分以丹参酮为有效成分参考指标;水溶性成分以丹酚酸B、原儿茶醛、丹参素为有效成分参考指标2。
2 丹参有效成分的提取分离
丹参有效成分包括脂溶性成分和水溶性成分,因此提取分离工艺分为脂溶性成分二萜醌类的提取分离和水溶性成分酚酸类的提取分离。近年来,对于丹参有效成分提取分离方面的研究较多,主要涉及到:总有效成分的提取分离、二萜醌类的提取分离和酚酸类的提取分离。笔者分析了各种提取分离法的优缺点,为丹参有效成分的提取分离及丹参药理学活性物质基础的研究提供参考。
2.1 总有效成分的提取分离丹参的有效成分复杂,总有效成分的提取率较低。主要的提取方法有醇提法3、超声法4、CO2超临界萃取法(SFE)5。梯度渗漉法具有浓度梯度大,浸出效果好,溶剂用量少,适合于有效成分含量低的中药材提取等优点。刘杨等6通过比较回流法、一般渗漉法和梯度渗漉法3种提取工艺对丹参有效成分提取率的影响,得出最佳工艺为梯度渗漉法。当二氧化碳处于临界状态(温度31.26 ℃,压力72.9 atm)以上时,即为超临界流体。张玉祥等7通过对多种提取工艺(传统水煎法、乙醇回流法、超声波法、超临界萃取法)的比较,得出CO2超临界流体萃取法提取具有较高的提取率。这是由于传统方法多数都有加热过程或产热过程,而超临界萃取法受热小,并且同时具有液体溶剂的溶解能力和气体的传递特性,萃取后溶质和溶剂易于分离等优点,特别适合于热敏性、易氧化物质的分离或提纯。而丹参酮ⅡA对光不稳定,丹酚酸B受热易分解,这就是传统提取方法的提取率较超临界萃取法提取率低的原因。
2.2 二萜醌类成分的提取分离二萜醌类,又称丹参酮,主要包括丹参酮ⅡA、异丹参酮、隐丹参酮和二氢丹参酮等。丹参酮在临床上的应用较早,对其提取分离的研究也较为深入。其提取方法主要有醇提法8,超声提取法9,CO2超临界流体萃取法10,微波辅助萃取法(MAE),加压液体萃取法(PLE);分离的方法有高速逆流色谱法(HSCCC),柱层析和真空液相层析法(VLC)。
赵小亮等11归纳了丹参有效成分丹参酮的各种传统提取方法,比较了传统提取方法与CO2超临界流体萃取法(SFE)各自的优缺点,得出SFE法提取率较高,可用于丹参酮的提取。MAE法是利用微波能所产生的破壁效应,使植物细胞内的活性成分较完全的释放出来,然后利用固相萃取法,也称液—固萃取法,将保留在吸附剂上的样品根据选择性吸附与选择性洗脱的过程差异,先用适当溶剂系统洗去杂质,然后再在一定条件下选用不同极性的溶剂,将目标成分洗脱下来,达到分离净化和富集的目的。微波辅助萃取法(MAE)可以在室温下操作,避免了高温带来的损失,并且时间短,因此具有提取时间短,效率高和有机溶剂用量少的优点。Pan等12对MAE法与传统方法提取丹参酮进行了比较,丹参酮IIA、隐丹参酮和丹参酮I的提取率分别为0.29%,0.23%和0.11%,结果是MAE法较传统方法优越,也适合大规模的提取。其最佳提取工艺为乙醇浓度为95%,微波辅助萃取2 min,液—固比例为10∶1(ml/g)。加压液体萃取法(PLE)采用常规溶剂,在较高的温度(50~200℃)和压力 (10.3~20.6 MPa)下用溶剂对固体或半固体样品进行萃取的样品前处理技术,Li等13采用PLE法对4种丹参酮进行了提
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