微生物与免疫学考试.docVIP

1、试述医学上几种重要的细菌质粒及其作用。 答:医学上常见的几种重要的细菌质粒有： 质粒类型：F质粒；R质粒；Col质粒；Vi质粒；代谢质粒F质粒（fertility?plasmid?）：又称致育因子或性因子，62×106Dalton，94.5kb，其中1/3基因（tra区）与接合作用有关，它编码性菌毛，凡有F质粒的菌株，其表面就会产生1-4条性菌毛。R质粒（resistence?plasmid?）：即抗性质粒或耐药性质粒，编码对抗生素（R）和重金属盐类的耐药性。Col质粒（colicinogenic?plasmid?）：又称产大肠杆菌素质粒，其分子量约4×104?~?8×104Dalton。属于细菌素质粒。Vi质粒：又称毒力质粒，编码与致病性有关的致病因子。这类质粒为大质粒，分子量约为40-120×106?Dalton。代谢质粒：编码产生各种相关的代谢酶，如沙门氏菌发酵乳糖的能力由质粒编码。 2、假如你分离到了一株未知细菌，请你根据细菌分类与鉴定的原则，设计试验进行鉴定（要求鉴定到基因型）。 答：将分离到的细菌增菌培养后提取DNA,并作为模板，利用16RNA通用引物PCR扩增取出进行跑胶测试纯度与大小，一般是1500bp左右PCR产物进行基因测序，然后在Genbank中进行blast基因同源性比对，这样就可以分析出菌种的基因型了。 3、试述新型动物疫苗的种类及其应用前景。 1、亚单位疫苗：安全性好，不含传染性成分。含刺激成分少，引起的应激小。稳定性易于保存运输，产生的免疫应答能与感染产生的免疫应答相区别，更适合疫病的控制与净化。 2、基因工程活载体疫苗：将保护性抗原基因转入病毒载体，病毒载体能插入多种病原的保护性抗原基因，能制作多价苗和联苗。 3、基因缺失疫苗：安全性好，病毒毒力不易返强，产生的免疫应答保护性好，接种容易（局部接种）。 4、核酸疫苗：直接将编码病原保护性抗原基因插入载体注入肌肉，能在机体产生抗原并引起免疫应答。 5、合成肽疫苗与表位疫苗：用化学方法合成病原保护性多肽，并将其连接到载体上与佐剂混合注入机体。此种疫苗能在同一载体上连接多种保护性多肽。 6、转基因植物疫苗：转入保护性抗原基因的植物表达有免疫活性的保护性抗原，将此种植物饲喂动物，保护性抗原在肠道被识别产生免疫应答。此种疫苗接种方便，生产工艺简单但开发较难。 4、试述单克隆抗体的制备原理及应用。 答：单克隆抗体制备原理：用人工的方法将产生特异性抗体的B细胞与骨髓瘤细胞融合，形成B细胞杂交瘤，这种杂交瘤细胞既具有骨髓瘤细胞无限繁殖的特性，又具有B细胞分泌特异性抗体的能力。并将这种杂交瘤细胞注射入小鼠腹腔或者在体外培养，然后再收集特定的单克隆抗体。 应用：提高血清学方法的特异性、重复性、稳定性和敏感性。免疫学方面研究抗体结构和氨基酸序列的分析等。用于肿瘤的临床治疗效果较佳。纯化对应的抗原。 5、某一猪场进行过猪瘟疫苗的接种，但仍发生了猪瘟，为什么？你应该采取哪些对策避免此类事件的发生？ 答： 1动物本身的因素 动物本身因素造成的免疫失败:包括免疫力低下,母源抗体的影响,免疫抑制,应激反应,饲料 中毒等。 1.1免疫力低下 免疫力是机体对抗原做出应答的能力,它能影 响疫苗的免疫力。先天的免疫器官发育不全,免疫 系统缺陷,如脾、法氏囊、胸腺发育不全,缺乏 T、B淋巴细胞和巨噬细胞,疫苗接种后都会影响 疫苗的免疫力,达不到预期的免疫效果。 1.2母源抗体 近年来,种畜禽广泛使用各种疫苗,使幼畜禽 的母源抗体水平显著提高。如果在母源抗体处于高 水平期间进行疫苗接种,母源抗体会中和疫苗成分 并抑制其在动物体内的增殖,从而无法获得预期的 免疫效果,甚至导致免疫失败。一些幼畜禽易患的 疾病需高母源抗体的保护,如过早的使用活疫苗就 会造成免疫失败只有根据母源抗体的消长, 适时接种疫苗,才能有效的达到预期的免疫效果。 1.3免疫抑制 机体感染免疫抑制性病原,会使其免疫系统受到不同程度的侵害,从而抑制了动物免疫系统对疫 苗的免疫应答能力,使疫苗保护力下降。先天性发育不良或 营养不良,也会引起抵抗力下降,在免疫接种后可能引起严重反应或导致免疫失败。 1.4应激反应1.5饲料中有毒物质2疫苗的因素 疫苗因素造成的免疫失败,包括:血清型、疫苗的质量、疫苗的相互干扰等几个方面。 2.1血清型虽然有多种血清型,互相间不能提供交叉保护,也不能产生交叉免疫,故选用疫苗毒株的 血清型应与本地区和场流行毒株的血清型相一致, 否则就会达不到理想的免疫效果 2.2疫苗的质量 弱毒疫苗的关键是免疫原性和毒价,灭活苗的 关键是有效病毒含量,为此疫苗的使用和采购要选 用通过农业部GMP认证的企业,不要使用来源不 明,标识不清,非法生产和非法进口的疫苗,否则 会导致免疫失败。 2.3疫苗相互干扰