棉粕源酵母发酵饲料的研究.pdfVIP

摘 要 试验目的：本论文采用二因子有重复试验设计法和多因子多水平均匀设计法优化棉粕源主体底 物发酵的菌种比例和接种量、发酵参数、底物辅料组成和底物微量元素添加量等，最后通过优化组 合进行二元复合发酵，通过对发酵产物中游离棉酚含量、酵母菌数、蛋白酶活性、淀粉酶活性等指 标的测定，评定发酵产物的生物学特性和营养价值。其目的是将酵母培养物的生物学特性与新疆丰 富棉粕资源的脱毒利用有机地结合起来，开发新型生物活性蛋白饲料——棉粕源酵母发酵饲料。 试验方法：本论文主要是由四个优化试验和一个综合优化试验组成。试验一：采用的是二因子 有重复的试验设计方法，从接种量（1mL、2mL 、4mL 、8mL、16mL）、和接种比例（1/9、3/7、5/5、 7/3、9/1 ）2 因素 5 水平着手，按照二因素有重复试验值的设计表，共设计 25 个试验处理，通过测 定发酵产物中游离棉酚含量，研究不同处理组合对游离棉酚含量的影响，探讨其变化规律，得出热 带假丝酵母 ZD-3 和酿酒酵母 ZD-5 对棉粕源基础底物复合发酵的优化接种量和接种比例。试验二： 是在试验一优化结果上，采用均匀设计的试验方法，从发酵温度（20min 、25min 、30min、35min、 40min ）、时间周期（12h、24h 、36h、48h 、60h ）、底物初始水分（35%、40% 、45% 、50%、55% ）、 底物初始 pH （5.5、6.0、6.5、7.0、7.5 ）4 因素 5 水平着手，按照均匀设计表 U 4 5(5 ) ，共设计 5 个试 验处理，通过测定不同处理组合发酵产物中的游离棉酚（FG ）含量和酵母菌数量等指标，经回归方 程分析得到发酵温度、时间周期、底物初始水分和 pH 等的最优发酵条件参数，本试验旨在优化棉 粕源生物蛋白饲料二元复合发酵工艺参数。试验三：在复合发酵接种量和接种比例及发酵工艺参数 优化的基础上，对提供微生物营养源的棉粕源生物蛋白饲料底物辅料组成进行优化，试验采用 9 因 子 12 水平均匀设计法，9 因子分别为X1 （鱼粉，有机氮源）、X2 （尿素，无机氮源）、X3 （糖蜜， 酵母易发酵糖源）、X4 （甘露糖，酵母菌体的组成成分）、X5 （硫酸镁，补充镁、硫元素）、X6 （氯 化钠，补充氯、钠离子）、X （K HPO /KH PO ，补充钾、磷元素）、X （CaHPO ，补充钙、磷 7 2 4 2 4 8 4 元素）、X 9 9 （硫胺素，酵母菌体的组成成分）。按照均匀设计表U12 (12 )，共设计 12 个试验处理， 通过测定发酵产物中 FG 含量和活性酵母菌数，确定脱毒效率高、活性酵母菌含量多的棉粕源生物 蛋白饲料底物辅料组成参数，为生产优质生物发酵饲料奠定基础。试验四：在试验一和试验二优化 结果的基础上，对参与微生物生命代谢及构建多种酶活性中心的复合酵母培养物底物中的微量元素 添加量进行优化，试验从硫酸亚铁、硫酸铜、硫酸锰、硫酸锌和亚硒酸钠等化合物在基础底物中的 添加量着手，采用 5 因子 6 水平均匀设计试验法，5 因子水平的设置既要考虑微生物因素，又要顾 及动物的安全因素，这样才可确保发酵产物安全性。发酵结束后测定变性底物中的酵母菌含量、FG 含量，统计分析试验结果，以酵母菌数最多、FG 含量最低的组合为优化结果。试验五：综合以上 研究结果，制备优质棉粕源酵母发酵饲料。发酵结束后，测定发酵产物产物酵母菌数、蛋白酶活性、 淀粉酶活性、游离棉酚含量以及常规营养指标（DM 、CP、AA 、EE 、NDF 、Ash 、Ca、P ）等，综 合评定产物的生物学特性和营养价值。 试验结果： 试验一：热带假丝酵母 ZD-3与酿酒酵母 ZD-5二元复合固体发酵的优化接种量和接种比例分别为 8mL，3:7 。 试验二：棉粕源酵母发酵饲料工艺参数的优化结果为：发酵温度32℃、发酵时间48h 、底物初始 水分40% 、自