微生物样本采集的标准化与规范化-培训课件.pptVIP

4. 便 1)常规培养：直接将便排在洁净、干燥的容器中。在1小时内送至细菌室，或将带有可见粪便的拭子置入无菌试管。条件：洁净、防漏容器或拭子运送。 标本量≥2克，≤1小时，室温，1次/天。 2）艰难梭菌：每天排5次以上水样便或软便的患者考虑检测。软便定义为不成形、表现为容器形状的便。检测成形便或硬便意义不大，往往只能指示正常菌群。艰难梭菌在空气中暴露长于15分钟即大部分死亡。-20℃冻存使毒素活性迅速丢失。将水样便或软便排在洁净、干燥的容器中。 无菌瓶≥5毫升，≤10分钟，室温；1次/2天。 3）肛拭子：小心将拭子插入肛门，大约在括约肌之上2-3厘米；轻轻旋转拭子采集肛门隐窝的标本；要在拭子上明显看到粪便，才能检测腹泻病原体。拭子采集，≤2小时，室温，1次/天。除了长期卧床、无便（如中毒性痢疾）患者及频繁腹泻患者，不推荐做拭子常规培养。用于检测淋病奈瑟菌、志贺菌、弯曲菌、B群链球菌的肛携带者以及不能留取粪便标本的患者。可检测霍乱弧菌。 5. 脑脊液： 以2%碘酊消毒穿刺部位，以酒精脱碘；在L3-L4、L4-L5或L5-S1椎间隙之间插入套管针；到达蛛网膜下腔之后抽出管芯，分别收集1-2毫升液体至3支无菌试管中。 最小量：细菌，≥1毫升， 真菌，≥2毫升， 抗酸杆菌，≥2毫升； 细菌：不要放冰箱 ≤15分钟，室温。 6. 体液： 包括腹水、胆汁、关节液、心包积液、胸水、滑液等。 2%碘酊消毒皮肤；经皮用注射器抽吸或用外科方法获得标本；立刻送至细菌室，待检液体尽可能多送，不要送浸于液体中的拭子。细菌和真菌检测可使用血培养瓶、无菌螺盖瓶以及带橡胶塞注射器。 细菌：≥1毫升，真菌：≥10毫升，分枝杆菌：≥10毫升，≤15分钟，室温。 7. 脓肿 1）开放脓肿：如有可能抽吸脓肿；或用拭子深入损伤部位并旋转抹取脓肿壁，损伤基底部和脓肿壁最有培养价值，送检脓肿表面标本会培养出非感染性的定植细菌。使用拭子采集，≤2小时，室温，1次/天/来源。 2）闭合脓肿：以注射器抽吸脓肿，排出空气，将脓液注入无菌运送容器或血培养瓶。 标本量≥1毫升，≤2小时，室温，1次/天/来源。 8. 骨髓 按外科切口准备穿刺部位。接种于血培养瓶或置于无菌试管， ≤24小时，室温，1次/天。 9. 静脉导管 以75%酒精消毒导管四周的皮肤；以无菌术抽出导管，剪下远端5厘米长的导管直接置入无菌试管；立刻送至细菌室并防干燥。无菌试管运送，≤15分钟，室温，可接收做培养的静脉导管：中心静脉的、测中心静脉压的、末梢静脉的、动脉的、脐的、营养过度患者的等。 10. 褥疮 褥疮拭子培养的临床意义不大。应选择供活检组织或注射器吸出物。以无菌盐水清洗褥疮表面；如不做活检，用力以拭子抹取褥疮基底部；将拭子置入肉汤培养基中。≤2小时，室温，1次/天/来源。 参考文献 汪复 张婴元 吴菊芳等，实用抗感染治疗学，北京： 人民卫生出版社，2004，24 ~33. 叶应妩 王毓三 申子瑜等，全国临床检验操作规程（第三版），南京：东南大学出版社，2006，736~754 * * 由于细菌和真菌不能一直存在于血液中，单个血培养组合 的敏感性是有限的。 一项最近的研究调查显示用连续血培养监测系统能够累积统 计超过24小时血培养敏感性结果。我们可以观察到三个血培 养组合（每个组合两瓶，每个组合血量20ml，每瓶10ml） 的累积检出率是：第一组检出率73.2%，第二组累积检出率 93.9%，第三组累积检出率96.9%。如果做第四个血培养组 合，血流感染的检出率＞99%16。 * * * * 需要多少血量？ 血液中细菌和真菌的最佳检出率依赖于培养所需的足够的 血量。采集充足血量能确保低浓度的致病性细菌或真菌的 检出。当怀疑心血管系统(例如：心内膜炎)感染的时候，这 是最基本的要求。 血培养物每增加一毫升，成年人血液的微生物的检出率增 加，直到增加到30毫升13。这归因于成人每毫升血较低数量 的菌落形成单位(CFU)3。 对各个血培养组合来说，要从血流感染的患者血液中培养 出微生物，增加血量是最显著的14。 微生物样本采集的标准化与规范化 基本原则（一） 采集标本前局部应做好准备工作，标本必须直接采自病变部位。 尽可能在合适的时间采集。 例如：清晨的痰和尿液含菌量较多，因此是采集的最佳时间。了解感染性疾病的自然过程有助于决定采集何种标本及采集时间。 必要的免疫学知识对解释血清学结果十分有用。 应尽量采集足量的标本送实验室。 例如：成人的血培养标本每次宜采集10ml以上。 基本原则（二） 使用合适器械及运送容器很重要，所有标本都应使用无菌容器；棉拭子