2.2.2、动物细胞融合和单克隆抗体.ppt

2.2.2、动物细胞融合和单克隆抗体 重点和难点： 1、了解动物细胞融合的过程。 2、掌握单克隆抗体的制备。 3、举例说出动物细胞融合与单克隆抗体制备的原理和应用。 材料：浆细胞在体内只能由B淋巴细胞增殖、分 化而来,不再进行分裂,在体外培养的条件下，也很难分裂。 4. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是 （ ） ①淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合细胞　 ④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 ⑤杂交瘤细胞 A.②④ B.①③⑤　　 C.①②③④ 　 D.②③ * 鼠细胞 人细胞 人工诱导 杂交细胞 1、动物细胞融合:也称细胞杂交，是指两个或多个细胞结合形成一个细胞的过程。P52 2、条件：聚乙二醇（PEG)、灭活的病毒、电激。 P52 一、动物细胞融合 P52 思考： 为什么灭活的病毒能作诱导剂？ 灭活丧失感染性，但保留融合活性。 3、动物细胞融合的原理是： 细胞膜的流动性。 4、动物细胞融合过程 P52 5、动物细胞融合技术的意义和应用 （1）意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。P52 （2）应用：用于研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种的培育等重要手段，特别是利用细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术，为制造单克隆抗体开辟了新途径。P52 问题： 抗体由什么细胞产生？ 其化学本质是什么？ 主要分布在哪里？ 浆细胞 （ 效应B细胞） 血清 免疫球蛋白 二、单克隆抗体 P52 1、抗体的传统生产方法： 从血清中分离抗体 （2）、特点： 产量低、纯度低，且抗体的特异性差。 多种浆细胞 动物体内 多种抗体 抗原 (1) 、过程 提示： 1 .什么细胞可以产生抗体？ 2 .什么细胞可以无限增殖？ 思考：用什么方法才能让B淋巴细胞在体外培养时 既能产生抗体又能无限增殖? 能否通过特定浆细胞体外培养的方式大量获 得抗体? B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 培养骨髓瘤细胞 融合 3种杂种细胞 AA\AB\BB 在具有筛选作用的培养基上培养：获得杂种细胞。 单克隆抗体 2、单克隆抗体的制备过程 P53 第2次筛选：在杂种细胞中筛选出能产生所需抗体的杂种细胞（即杂交瘤细胞）。 制备B淋巴细胞 最后是体内培养、体外培养 3、单克隆抗体的应用 p54 1）优点：准确、高效、简易、快速。 p54 2）应用： p54 ①、作为诊断试剂。具有准确、高效、简易、快速的优点。 ②、用于治疗疾病和运载药物。 1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（ ） 　 A.经过免疫的B淋巴细胞 B.没经过免疫的T淋巴细胞 C.经过免疫的T淋巴细胞 D.没经过免疫的Ｂ淋巴细胞 A 2.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较中，正确的是（ ） 诱导融合的方法完全相同 B.所用的技术手段基本相同 C. 操作步骤基本相同 D. 都能形成杂种细胞 D 3.只能使动物细胞融合的常用诱导方法是（ 　 ） A．PEG　　 B．灭活的病毒 　 C．电刺激 D．离心 B C *