cmyc在鼻腔内翻乳头状瘤中的表达及临床意义论文.docVIP

　　cmyc在鼻腔内翻乳头状瘤中的表达及临床意义论文 【摘要】 目的：探讨原癌基因cmyc在鼻腔内翻乳头状瘤(SNIP)中的表达及临床意义，以期能寻找到cmyc与SNIP发生的性。方法：收集武汉市中心医院病理科2000～2007年鼻腔内翻乳头状瘤存档蜡块20例，另取瘤组织周围组织5例作对照，采用免疫组织化学SP法检测cmyc相关抗原。在显微镜下(×400) ,测定每个视野下阳性反应的平均光密度、阳性反应面积和所有细胞总面积,计算阳性面积率。采用HPIAS2000高清晰度彩色病理图文报告管理系统对cMyc在各组中的表达进行定量分析。结果：SNIP中cMyc表达的平均光密度为0.3290±0.0218, 对照组cMyc表达的平均光密度为0.0854±0.0112;SNIP中cMyc表达的阳性面积率为0.2873±0.0152, 对照组cMyc表达的阳性面积率为0.0754±0.0124，SNIP与对照组比较(P 0.05)，差异有显著性。结论：cmyc在鼻腔内翻乳头状瘤中的高表达，有助于SNIP的诊断。 【关键词】 cmyc; 鼻腔内翻乳头状瘤; 免疫组织化学; 相关分析 鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤( sinonasal inverted papilloma ,SNIP) 是发生于鼻腔鼻窦的粘膜上皮源性良性肿瘤,其病理组织学为良性,但具有恶性生物学行为,呈侵袭性生长,局部破坏性强,易复发和恶变,据报道其复发率从30 %～ 78 %不等, 恶变率从5 %～21 %不等1，探讨影响其发生的因素一直是临床及病理医师关注的焦点。原癌基因cmyc自发现以来一直受到人们的广泛重视,.freelyc在鼻腔内翻乳头状瘤与正常粘膜组织中的表达，旨在探讨cmyc在鼻腔内翻乳头状瘤的发生中的表达及意义。 1 材料和方法 1.1 材料 1.1.1 材料来源 收集武汉市中心医院病理科2000～2007年鼻腔内翻乳头状瘤存档蜡块20例，其中男性13例，女性7例。所有切片经病理学专家诊断为鼻腔内翻乳头状瘤。另取瘤组织周围组织5例作对照。 1.1.2 材料分组 将实验分为鼻腔内翻乳头状瘤组和对照组。 1.2 主要试剂和仪器 1.2.1 主要试剂 浓缩型鼠抗人cMyc 单克隆抗体,(北京中山生物技术有限公司);超敏即用型SP通用型免疫组织化学试剂盒(福州迈新公司);DAB显色试盒及多聚赖氨酸(北京中山生物技术有限公司)。 1.2.2 主要仪器 Y PBS(pH 7.4)漂洗3×3 min; ② 抗原修复(柠檬酸缓冲液微波抗原修复法)，室温自然冷却后，0.01M PBS(pH 7.4)漂洗5×3 min; ③ 滴加3%过氧化氢，37℃湿盒孵育10min以抑制内源性过氧化物酶活性，0.01M PBS(pH 7.4)漂洗3×3 min; ④ 正常羊血清37℃湿盒孵育10min以减少非特异性背景; ⑤ 甩去多余血清，分别滴加一抗，4℃孵育过夜，0.01M PBS(pH 7.4)漂洗3×5 min; ⑥ 滴加生物素标记的二抗37℃湿盒孵育10min，0.01M PBS(pH 7.4)漂洗3×3 min; ⑦ 滴加链霉素抗生物素蛋白过氧化物复合物37℃湿盒孵育10min，0.01M PBS(pH7.4)漂洗3×3 min; ⑧ 滴加新鲜配置的DAB显色液显色，光镜下控制反应时间(约3～5min)，自来水冲洗终止反应; ⑨ 苏木素复染，流水冲洗，1%盐酸酒精分色数秒，流水冲洗，0.1%氨水返蓝; ⑩ 梯度酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封片并镜检; 用PBS代替一抗作为阴性对照组，购买的阳性片作为阳性对照组。 1.3.3 免疫组织化学结果判断 cMyc 以胞核或胞质出现棕黄色颗粒为阳性反应。阴性对照组除细胞核染成蓝色外，应无棕黄色反应物。 采用HPIAS1000 高清晰度彩色病理图文报告管理系统(同济千屏影像公司)对cMyc的表达进行定量分析，每张切片随机选取5个完整而不重叠的高倍镜视野(×400) ,测定每个视野下阳性反应的平均光密度、阳性反应面积和所有细胞总面积,计算阳性面积率(阳性面积率=单位面积中阳性反应的总面积/单位面积中细胞的总面积×100%)。以每例5个视野的平均光密度、阳性面积率的平均值作为该例的测量值。 1.4 统计学处理 数据以均数±标准差表示，用SPSS11. 5 软件对各组免疫组织化学反应阳性颗粒的平均光密度、阳性面积率做单因素方差分析和SNK(q) 检验，检验水准α为0.05。 2 结果 瘤细胞核和细胞质中有大量棕黄色颗粒, cMyc 表达强; 对照组中,粘膜细胞核及细胞质中仅有少量棕黄色颗粒, cMyc 表达弱。图像分析结果显示: 鼻腔内翻乳头状瘤cMyc表达的