esfatin1对脑干孤束核葡萄糖敏感神经元电活动影响论文.docVIP

　　esfatin1对脑干孤束核葡萄糖敏感神经元电活动影响论文 【摘要】 目的 观察nesfatin1对脑干孤束核葡萄糖敏感神经元电活动影响，探讨其抑制摄食作用的可能机制。方法 采用全细胞膜片钳技术，在电流钳下，记录nesfatin1对孤束核葡萄糖敏感神经元电活动的影响。结果在孤束核中共记录到30个神经元，给予葡萄糖(5 mmol/L)灌流后，有18个(60.0%)对葡萄糖有反应，其中13个放电频率升高(GEXC,t=2.509,P 0.05)，5个放电频率下降(GINH,t=12.79,P 0.01).freelol/L)后12个放电频率增加(t=3.346,P 0.01)，1个无反应。在5个GINH神经元，灌流nesfatin1 (10 nmol/L)后4个放电频率减少(t=11.877,P 0.01)，1个无反应。 结论nesfatin1能够调制孤束核葡萄糖敏感神经元的兴奋性，这可能是nesfatin1作用于孤束核抑制摄食的机制之一。 【关键词】 nesfatin1;孤束核;神经元;葡萄糖;膜片钳术 ABSTRACT Objective To observe the effects of nesfatin1 on glucosesensitive neurons in nucleus tractus solitarius(NTS), and explore the possible mechanisms of NTS in controlling food intake. Methods C)途径发挥抑制摄食的作用。我们以前研究了Ⅰ、Ⅱ型糖尿病病人空腹血浆nesfatin1的水平，结果显示Ⅰ型糖尿病病人空腹血浆nesfatin1水平略高于正常人，但差异无统计学意义;Ⅱ型糖尿病病人空腹血浆nesfatin1水平则均明显低于正常人和Ⅰ型糖尿病病人2。脑干孤束核(NTS)含有葡萄糖敏感神经元3，其中包括葡萄糖兴奋型神经元(GEXC)和葡萄糖抑制型神经元(GINH)。许多研究证明，NTS葡萄糖敏感神经元参与摄食的调控。 最近,.freela公司产品。 1.2 溶液的配制 按文献8方法配制细胞外液和内液。细胞外液(即人工脑脊液， ACSF)的成分为：124 mmol/L NaCl，3 mmol/L KCl，1.3 mmol/L NaH2PO4，26 mmol/L NaHCO3，5 mmol/L Hepes，2 mmol/L CaCl2，1 mmol/L MgSO4，10 mmol/L glucose，用1 mmol/L的NaOH调节pH值至7.35～7.45。电极内液配方:130 mmol/L Kgluconate，10 mmol/L KCl，1 mmol/L MgCl2，1 mmol/L CaCl2，10 mmol/L Hepes，1 mmol/L EGTA，4 mmol/L Na2ATP，0.5 mmol/L GTP，用1 mmol/L的NaOH调节pH值至7.35～7.45。4 ℃冰箱保存备用。 1.3 实验方法 1.3.1 大鼠脑干NTS脑片制作 大鼠乙醚麻醉后，迅速断头，剪开头皮，去除颅骨，于含体积分数0.95 O2和0.05 CO2冰冷的ACSF中取下脑干组织块，放于浸有ACSF的滤纸上将脑干修块，然后同琼脂块一起用502胶水粘在切片槽的固定位置。槽中含有冰冷的ACSF (0 ℃左右)，并不断通入含体积分数0.95 O2和0.05 CO2的混合气体。使用振动切片机(S 1.56及SPSS统计学软件进行数据处理，结果以±s表示，数据间比较采用t检验。 2 结 果 2.1 NTS葡萄糖敏感神经元的鉴定 实验共记录到30个具有自发放电的神经元，灌流含葡萄糖(5 mmol/L)的ACSF后，其中13个神经元(43.3%)放电频率明显增高，其平均放电频率从(0.63±0.2)Hz增加到(1.73±0.52)Hz(t=2.509,P 0.05)，用ACSF冲洗后恢复，即鉴定为GEXC(图1);12个神经元(40.0%)无明显反应;5个神经元(16.7%)放电频率明显减少, 其平均放电频率由(2.74±0.08)Hz减少到(0.63±0.18)Hz(t=12.79,P 0.01)，此即GINH(图2)。 2.2 nesfatin1对葡萄糖敏感神经元放电活动影响 在NTS的13个GEXC神经元中，灌流nesfatin1后发生兴奋反应的有12个(92.3%)，平均放电频率由(1.24±0.40)Hz增加到(3.40±0.82)Hz(t=3.346,P 0.01)(图1)，无反应的1个。在5个GINH神经元中，灌流nesfatin1后表现为抑制反应的