HPLCMS法测定不同产地冻干鲜鱼腥草中黄酮类成分的含量论文.docVIP

　　HPLCMS法测定不同产地冻干鲜鱼腥草中黄酮类成分的含量论文 孟江,廖华卫，董小萍，赵中振 【摘要】 目的 考察不同产地冻干鲜鱼腥草黄酮类活性成分的含量。方法 采用HPLCMS法，Alltima C18柱；流动相：体积分数为0.2%的冰醋酸溶液为流动相A，乙腈为流动相B，梯度洗脱：0～20 min，5%～20% B；20～40 min，20%～20.5% B；40～50 min.freelL/min；柱后分流：0.4 mL/min进质谱仪；UV和MS同时检测。结果 香港产的鱼腥草5个黄酮类成分含量都低于四川峨嵋和广东产地，四川峨嵋产地的芸香苷、金丝桃苷、槲皮苷含量均高于广东产的，而广东产地的槲皮素3OβD半乳糖7OβD葡萄糖苷和槲皮素3OαL鼠李糖7OβD葡萄糖苷含量高于四川峨嵋产地。结论 不同产地冻干鲜鱼腥草的黄酮类活性成分含量不同。 【关键词】 冻干鲜鱼腥草；HPLCMS；黄酮；含量测定 Quantitative analysis of flavonoids in freezedried Houttuynia cordata from different habitats by HPLCMS Abstract:Objective To pare the contents of flavonoids in freezedried Houttuynia cordata from different habitats. Methods Samples a C18 column. The mobile phase consisted of 0.2% acetic acid in of 20% (B) in 0～20 min, 20%～20.5% (B) in 20～40 min, 20.5%～35% (B) in 40～50 min. The floL/min. Results The contents of five flavonoids in HongKong nopyranosyl7OβDglucopyranoside in Guangdong Province different habitats． Key a C18，5 μm， 7.5 mm×4.6 mm (保护柱)+4.6 mm×150 mm（分析柱）。柱温：室温；流速：0.6 mL/min；柱后分流：0.4 ml/min进质谱仪；流动相：体积分数为0.2%的冰醋酸溶液为流动相A，乙腈为流动相B，梯度洗脱：0～20 min，5%～20%B；20～40 min，20%～20.5%B；40～50 min，20.5%～35%B；检测条件：UV280 nm，MS同时记录总离子流（TIC）色谱图。进样量：10 μL。 质谱条件：离子化方式为电喷雾离子化(ESI)；负离子形式；扫描范围：130～800 amu；干燥气流速（氮气）:7 L/min，干燥气温度：400 ℃；雾化气压:5 000 V; 聚焦环电压: 380 V。 5个对照品的［M+1］+ (m/z)分别为槲皮素3OβD半乳糖7OβD葡萄糖苷（1）627，槲皮素3OαD鼠李糖7OβD葡萄糖苷（2）611，芸香苷（3）611，金丝桃苷（4）465，槲皮苷（5）449，质谱图见图1。 A.槲皮素3OβD半乳糖7OβD葡萄糖苷； B.槲皮素3OαD鼠李糖7OβD葡萄糖苷； C.芸香苷； D.金丝桃苷； E.槲皮苷 图1 5个对照品的质谱图（略） Fig.1 MS chromatograms of five standard substance 2.2 标准曲线的制备 分别精密称取各对照品适量，制成每1 mL含0.2 mg的甲醇溶液。取5个不同浓度的对照品溶液分别进样10 μL，按上述色谱条件测定蜂面积，结果以进样质量浓度为横坐标(ρ)，以峰面积值为纵坐标(A)进行线性回归，得到的回归方程见表1。 2.3 样品溶液的制备 精密称取0.5 g的样品粉末，置50 mL的容量瓶中，加体积分数为70％的甲醇至刻度，摇匀，超声30 min，室温放置30 min，过滤。取滤液2 mL，0.2 μm微孔滤膜滤过，进样10 μL。 2.4 稳定性试验 取同一供试品溶液（广东产地），在前述色谱条件下分别在0、2、4、8、24 h进样10 μL，按上述色谱条件测定含量，各对照品含量的RSD值均大于3.12%。结果表明，供试品溶液在24 h内稳定。 表1 各对照品的标准曲线（略） Tab.1 Validation parameters for s