Pyk2在Goldblatt鼠左心室肥大心肌中的变化论文.docVIP

　　Pyk2在Goldblatt鼠左心室肥大心肌中的变化论文 吴浩 邢淑华 陈清枝 武维恒 【摘要】 目的 以两肾一夹肾性高血压大鼠为模型,研究肥大心肌中富脯氨酸蛋白酪氨酸激酶（Pyk2）介导的细胞信号转导的变化及其意义。方法 制备两肾一夹肾性高血压大鼠模型,分别于术后第1、4、8和12周测定尾动脉血压和心肌肥大指数,免疫组织化学法检测肥大心肌组织中Pyk2及其磷酸化表达。结果 大鼠肾动脉狭窄术后4周心肌肥大已发生,8周至12周心肌肥大进一步加重;术后4、8、12周大鼠心肌组织Pyk2活性逐渐增加,心肌Pyk2活性与心肌肥大程度呈显著正相关。结论 随肾动脉狭窄时间的延长, Pyk2活性逐渐增加是导致心肌肥大加剧的重要原因；Pyk2非受体酪氨酸激酶介导的信号通路可能是心肌肥大的重要的信号通路。 【关键词】 富脯氨酸蛋白酪氨酸激酶 心肌肥大 肾性高血压 大鼠 Abstract： Objective To investigate the changes of Pyk2 （proline-rich tyrosine kinase 2） mediated signal transduction in the myocardium of renovascular hypertensive rats（RHR of Goldblatt）. Methods Todel ass to body yocardial hypertrophy. Pyk2 protein expression and phosphorylation ined by immunohistochemisry． Results Blood pressure， LVAP无明显升高者不进入后续实验。 1.3 实验方法及指标测定 实验分为8组,每组6只。1～4组为同周龄假手术组,5～8组为手术成功模型组，分别于术后1周（第1、5组）、4周（第2、6组）、8周（第3、7组）、12周（第4、8组）进行观察指标的测量。 1.3.1 MAP、左心室质量与体质量比值〔ω（LVAP无明显差异。模型组术后第1周MAP即开始升高，第4周至12周时MAP为在170～220 mmHg，其中第8周与第12周大鼠MAP差异无显著性。除第1周外（P 0.05），其余各时点的MAP均显著高于假手术组（P 0.01）。 见图1。 2.2 肾动脉狭窄术后不同时期大鼠ω（LVAP变化 2.3 Pyk2活性变化 有报道，Pyk2在肥大的新生鼠心室肌细胞中表达增强［5］。为了观察在体高血压模型中是否存在Pyk2表达变化，在肾血管性高血压致左心室肥大的成年大鼠模型中检测Pyk2表达及其磷酸化变化。 免疫组织化学法显示模型组不同周龄组大鼠心肌Pyk2表达均较假手术组明显增加 （1周P 0.05;4～12周P 0.01）, 在各组免疫组织化学染色切片上均能在心肌细胞胞质中观察到呈阳性的棕黄色部分。与同周龄假手术组相比,模型组1周Pyk2活性增加21%,4周增加48%,8周增加186%，12周增加202%。提示Pyk2表达增高先于心肌肥大显著发生， Pyk2表达增加幅度随肾动脉狭窄时间延长而增加。见图3。 图3 肾动脉狭窄术后不同时期大鼠Pyk2活性变化 与假手术组比较：*P 0.05，**P 0.01 相关分析表明，在第1周模型组中Pyk2表达与ω（LV培养的肥大心肌中Pyk2磷酸化与Pyk2活化也存在相关［4］。别的细胞类型中还证实它是由下游信号向MAPK级联反应过渡所必需的。本实验观察到Pyk2酪氨酸磷酸化水平在模型组第1周就增高，一直保持升高到第12周,与同周龄假手术组相比有显著差异（1周P 0.05，4～12周P 0.01），在各组免疫组织化学染色切片上均能在心肌细胞胞质中观察到呈阳性的棕黄色部分，与同周龄假手术组相比, 模型组1周Pyk2磷酸化水平增加18%,4周增加47%,8周增加176%，12周增加206%。提示Pyk2磷酸化水平增高先于心肌肥大显著发生， Pyk2磷酸化水平增加幅度随肾动脉狭窄时间延长而增加。见图4。 相关分析表明，在第1周模型组中p-Pyk2与ω（LVotley ED, et al. Unique regulation of c-Jun N-terminal kinase by PYK2/CAK-beta in angiotensin II-stimulated vascular smooth muscle cells［J］. Biochem Biophys Res mun, 2001,286（4）:692-696. ［2］ Sasaki H, Nagura K, Ishino M, et al. Cloning and characterizat