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基于发光细菌法水质毒性检测系统 　　摘要：随着饮用水安全问题日渐突出，快速准确的水质毒性检测技术已经成为研究的热点。提出了一种基于发光细菌法的生物学检测系统，这一系统可以对水质毒性进行快速检测。微弱的荧光丢失在检测中得到了校准，光电检测的效率也得到了提高。实验结果表明本系统检测的可靠性可以达到甚至优于传统方法 关键词：发光细菌；生物学方法；快速检测；水质毒性；光电检测 中图分类号：TP311 文献标识码：A 文章编号：1009-3044（2017）05-0221-02 Abstract： Nowsdays， the industrial modernization is improving， drinking water safety issues become increasingly prominent. Rapid and accurate water quality toxicity detection technology has become a hot spot. A biological detection system based on luminescent bacteria method is proposed. The system can detect the toxicity of drinking water rapidly. In the detecting， weak fluorescence loss is calibrated， the efficiency of photoelectric detection system is improved. The experimental results show that the reliability of this system can achieve even be better than traditional methods. Key words： luminescent bacteria； biological method； fast detection； water toxicity； photoelectric detection 1 概述 ?l光细菌是一类自身能够进行生物发光的细菌，当遇到外界不利环境时，由于生理活动受到影响，细菌内的发光反应被抑制，发光程度也就受到影响。发光受抑制的程度跟有毒物质的毒性大小及其浓度有关，光强的变化可以利用光电检测技术获得，从而判断有害物质的毒性 为了测试设计系统的性能，检测的样品包括重金属盐，化学农药等，他们都会对发光细菌产生毒性。现有的水质检测技术有理化方法和传统生物评价方法。这些方法需要在实验室进行，大都需要实验仪器，测试结果需要花费24小时甚至更长时间。在这一设计中，首先要对发光细菌冻干粉进行菌种复活，制备好发光细菌试剂，然后，将待测毒物配置成不同浓度的溶液，至少配置两个稀释度，方便对比。本系统采用自动加样单元将参加反应的试剂加入反应池中，这一自动加样单元由主控芯片控制，可以避免人为操作的失误。在实验中，发光细菌冻干粉在复苏后，在正常的生理条件下，会恢复发光。在将各种待测试剂连接到本系统后，自动加样单元会将其加入到反应池中，在充分混合后，发光细菌发出的光强会发生变化，并且随着待测样品浓度增加，发光细菌的发光强度会变弱，通过检测发光强度的变化，对水质进行评估 2 实验材料和方法 2.1 检测细菌、待测毒物和备用试剂 测试用发光细菌：采用青海弧菌冻干粉，配有复苏液、渗透压调节液，36%的稀盐酸溶液和氢氧化钠溶液用于调节溶液pH 待测毒物有重金属盐（氯化汞，氯化镉，氯化镍，硝酸铅等），化学农药（杀虫剂敌敌畏），其他物质（氰化钾等） 2.2 检测原理 科学研究发现，不同发光细菌发光的机理都是由具有特异性的荧光酶（LE）、氧分子（02）、单核苷酸的黄素（FMNH2）、八碳以上的长链脂肪醛（RCHO）所参与的反应，其大致过程如下： 这一发光反应是由氧分子参与，将长链脂肪醛和还原性的黄素单核苷酸（FMNH2）氧化为长链脂肪酸及FMN。反应过程中会发出微弱可见光，需要在黑暗环境中观察。这一发光反应是发光细菌正常的生理代谢，正是利用发光细菌这一特征。在实验前，需要将参加反应的试剂浓度比，反应条件（pH，温度等）调整到最适宜范围，以获得稳定的峰值波长 2.3 系统设计 在本系统中，采用日本滨松H5773型光电倍增管，Pi-102台式ATP荧光检测仪的测量结果作为参照。采用瑞士ARL3460光谱仪测量光强度。系统的MCU采用AD公司的ADUC834单片机。本系统主要包括以下模块：试剂反应单元，荧光捕获单元，光校准单元和信号